Челнок томат: Томат Челнок (характеристика помидор, отзывы, выращивание)

Томат Челнок (характеристика помидор, отзывы, выращивание)

Это просто идеальный сорт для начинающих огородников, он несложен в уходе и очень вынослив. Давайте рассмотрим все основные достоинства и недостатки данного сорта. Начнем с краткого технического описания. Это детерминантное растение, его рост ограничивается примерно на 45 см. Как вывод растение не нуждается в подвязке и пасынковании. Выращивают томаты Челнок в открытом грунте (густота посадки примерно 4 растений на кв. метр.). Но это не означает, что его нельзя выращивать в теплице, просто это не совсем целесообразно, так как для теплиц есть более подходящие крупноплодные сорта томатов.

По срокам созревания помидоры Челнок считаются ультраскороспелыми, собирать первый урожай можно уже спустя 82-100 дней с момента всходов. А если добавить к этому, то что сорт устойчив к прохладному климату, то получим идеальный сорт для выращивания на Урале и Сибири. Устойчивость к низким температурам позволит нам произвести высадку рассады в открытый грунт немного раньше, что наряду с его скороспелостью позволит нам получить ранний урожай помидоров, еще до того как томаты начнут страдать фитофторой, если конечно вы не обработали их раствором бора или другим средством от фитофтороза. Хотя Челнок и сам по себе среднеустойчив к этой болезни. Плодоношение длительное, помидоры продолжают завязываться вплоть до осенних заморозков.

Томаты Челнок просты в выращивании, они не требовательны к уходу, но все же такие стандартные процедуры как полив, прополка, подкормка удобрениями и другие. Чтобы избежать ожогов на листьях, поливать нужно вечером, когда солнце уже не так палит. Вода не должна быть сильно холодной. Если нет сильной жары, то частоту полива можно сократить до 10-14 дней.

Соцветия закладываются через каждые 1-2 листа, а первое над 6-7 листом. Плоды красные, гладкие и мясистые с тоненьким носиком на конце, правда, не очень большие всего по 60г. Помидоры Челнок очень хорошие универсального назначения. Благодаря своей компактности они отлично подходят для цельноплодного консервирования и засолки. Помидоры хорошо транспортируются. Но откровенно говоря, судя по отзывам по вкусу сорт уступает другим крупноплодным сортам. Поэтому если есть возможность и необходимые условия для выращивания других сортов, то рекомендуется использовать их, но все же для некоторых регионов сорт Челнок будет не заменим.

Томат Челнок: характеристика и описание сорта

Томаты «Челнок» могут стать отличным вариантом для начинающих, ленивых или особо занятых огородников, у которых вовсе нет времени для ухода за посадками. Этот сорт отличается неприхотливостью и отличной выносливостью, для него не страшны погодные катаклизмы. Даже при самом скудном уходе «Челнок» может отдавать хороший урожай томатов. Подробное описание этого уникального сорта можно найти далее в нашей статье. Быть может, ознакомившись с предложенными фото и характеристиками, начинающие земледельцы и аграрии, желающие попробовать что-то новое, сделают правильный выбор для своего огорода.

Подробное описание

Сорт «Челнок» был получен российскими селекционерами и районирован для южных и центральных регионов страны. Он предназначен для открытого грунта, но при необходимости может успешно расти и плодоносить в теплице или под пленочным укрытием. Некоторые огородники-экспериментаторы выращивают «Челнок» и в комнатных условиях, устанавливая большие горшки на подоконнике или на застекленном балконе.

Кусты сорта «Челнок» детерминантные, штамбового типа. Их высота не превышает 50-60 см. Такие низкорослые растения имеют надежный, устойчивый стебель. На нем в небольшом количестве образуются пасынки и листья, которые периодически нужно удалять по мере нарастания. В целом штамбовый куст не требует усиленного формирования, поскольку самостоятельно регулирует свой рост. Такое саморегулирование позволяет экономить время агрария и является одним из достоинств сорта «Челнок».

Томаты «Челнок» формируют плодоносящие кисти выше 6 листа. На каждой из них образуется сразу по 6-10 простых цветков. При желании получить более крупные плоды, кисти прищипывают, оставляя только 4-5 завязи. Они особенно хорошо наливаются питательными веществами и соком, становясь в результате крупноплодными томатами. Если не прищипнуть плодоносящие кисти, то в результате можно получить большое количество томатов среднего размера. Пример таких плодов можно видеть выше на фото.

Все о помидорах «Челнок»

Помидоры «Челнок» имеют цилиндрическую форму. На их кончике может образовываться небольшой заостренный «носик». Окраска томатов на стадии зрелости ярко-красная. Кожица овощей плотная, устойчива к растрескиванию. При употреблении овощей дегустаторы отмечают ее некоторую грубость. Оценить внешние характеристики и описание томатов сорта «Челнок», можно просмотрев фото, предложенные в статье.

Вес томатов сорта «Челнок» в среднем составляет 60-80 г. При желании путем удаления некоторого числа завязей, можно получить помидоры весом до 150 г. Стоит отметить, что такая масса является рекордной для ультраскороспелых томатов, к которым относится сорт «Челнок».

Эксперты оценивают вкусовые качества сорта «Челнок» как высокие. Помидоры имеют плотную мякоть с 2-3 семенными камерами. Мякоть гармонично сочетает в себе легкую кислинку и большое содержание сахара. Аромат овощей не слишком выраженный. Использовать помидоры можно для приготовления свежих закусок, кулинарных блюд и консервирования. Из томатов получается густой сок и паста.

После переработки и консервирования овощи сохраняют свою сладость и уникальный вкус.

Важно! Большое количество сахара позволяет использовать помидоры для приготовления детского питания.

Урожайность и период созревания плодов

Томаты «Челнок» ультраскороспелые: для их созревания требуется порядка 90-120 суток. Такой относительно короткий период созревания овощей позволяет использовать сорт для получения первых овощей салатного назначения. Выращивать первые ультраскороспелые помидоры можно в теплице. В целом же рационально размещать саженцы томатов сорта «Челнок» на открытых грядках, поскольку для защищенных условий рекомендуется использовать высокоурожайные индетерминантные сорта, неограниченного роста.

Важно! Созревание томатов «Челнок» длительное и продолжается вплоть до первых заморозков.

Урожайность сорта «Челнок» зависит во многом от условий культивирования. Выращивая сорт в теплице можно получить порядка 10 кг овощей с 1 м² почвы. На открытых грядках урожайность может снизиться до 6-8 кг/м². Для получения большого количества овощей также важно соблюдать правила выращивания.

Устойчивость к заболеваниям и вредителям

К сожалению, при всех замечательных характеристиках и описании сорта томатов «Челнок», культура не имеет защиты от заболеваний и вредителей. Для предотвращения развития недугов следует особое внимание уделять профилактическим мерам. Так, перед посевом семена помидоров и почву нужно обработать марганцевым раствором или раствором медного купороса. Эти вещества удалят грибки и вирусы, способные вызвать некоторые специфические болезни.

Такое известное и широко распространенное заболевание как фитофтороз может поражать растения в условиях с повышенной влажностью и низкой температурой воздуха. Для предупреждения фитофтороза кусты томатов можно опрыскать чесночным настоем или специальными препаратами (фунгицидами). При установлении благоприятных условий для распространения фитофтороза нужно проводить профилактическую обработку 1 раз в 3 дня.

Возбудители вирусных заболеваний часто скрываются в грунте, поэтому высаживать томаты нужно на место, где прежде росли так называемые благоприятные предшественники (морковь, капуста, бобовые культуры, зелень). Не рекомендуется высаживать томаты на место, где прежде произрастали пасленовые культуры.

Профилактические меры защиты растений позволяют бороться и с вредителями. Так, рекомендуется регулярно пропалывать гряды и мульчировать приствольный круг помидоров торфом или соломой. Регулярный осмотр растений позволит обнаружить вредителей до их массового распространения. В борьбе с насекомыми можно использовать натуральные народные средства, биологические и химические вещества.

Важно! Высокую эффективность в борьбе с заболеваниями и вредителями проявляет йод, молочная сыворотка и хозяйственное мыло.

Достоинства и недостатки

Оценить сорт томатов «Челнок» можно только при объективном соотношении всех его достоинств и недостатков. Так, положительными качествами томатов являются:

• сравнительно высокая урожайность;
• превосходный вкус овощей;
• ранний срок созревания плодов;
• компактность растений;
• простота в уходе, отсутствие необходимости в тщательном формировании кустов;
• высокая устойчивость к холодам и неблагоприятным условиям;
• выносливость и неприхотливость;
• возможность выращивать томаты в защищенных и открытых условиях;
• универсальное назначение помидоров.

Конечно, все перечисленные достоинства являются очень важными, но некоторые существующие недостатки сорта «Челнок» также следует учитывать:

• низкая устойчивость к заболеваниям требует осуществления профилактических мер по защите растений;
• низкие температуры воздуха в период цветения томатов могут стать причиной снижения урожайности.

Многие земледельцы считают приведенные недостатки несущественными и поэтому безоговорочно из года в год отдают предпочтение именно сорту «Челнок».

Мы же предлагаем каждому читателю ознакомиться с подробной информацией, чтобы сделать объективный вывод о сорте и принять для себя обдуманное решение.

Особенности выращивания

Технология выращивания томатов «Челнок» существенно не отличается от правил культивирования иных сортов. Так, первым этапом выращивания является возделывание рассады:

• Семена сорта «Челнок» высевают на рассаду в конце февраля – начале марта.
• Обойтись без пикировки можно в том случае, если высевать семена сразу в емкости диаметром 6-8 см.
• Прорастание семян лучше всего проходит при температуре +25⁰С.
• После появления всходов контейнер с посадками нужно расположить на освещенном южном подоконнике, при необходимости продлить световой период для растений можно искусственно, путем установления люминесцентных ламп.
• Рассаду с 2-3 настоящими листочками следует пикировать в отдельные контейнеры.
• Рассаду томатов нужно поливать умеренно теплой водой по мере высыхания грунта.
• В случае замедленного роста растений и появления желтоватого оттенка на листьях, рассаду нужно подкормить удобрением с высоким содержанием азота.
• За неделю до высадки в грунт рассаду томатов нужно подкормить калийно-фосфорными удобрениями.
• Высаживать томаты «Челнок» в теплицу можно в середине мая. В открытый грунт высаживать растения следует в июне.

Важно! Точная дата высадки рассады томатов зависит от региона культивирования и конкретных погодных условий.

Почву в теплице и на грядке также следует подготовить к высадке рассады. Ее нужно взрыхлить и удобрить питательными микроэлементами. Высаживать кусты томатов «Челнок» нужно по 4-5 шт/м². После высадки растения необходимо полить и оставить для укоренения на 10 дней в полном покое. Дальнейший уход за помидорами заключается в поливе, рыхлении, прополке почвы. 3-4 раза за весь период вегетации, томаты нужно подкормить органикой и минералами. Полив для томатов должен быть умеренным.

Его регулировать нужно в зависимости от погодных условий.

Помимо приведенного описания, характеристик и фото сорта томатов «Челнок», а также его достоинств и недостатков, мы предлагаем ознакомиться с наглядной информацией на видео:

Дополнительные комментарии и отзывы агрария помогут при желании вырастить хороший урожай помидоров даже самому малоопытному земледельцу.

Отзывы

Екатерина Куйбышева, 29 лет, г. Улан-Удэ

«Челнок» — хороший сорт, который терпеливо выносит все капризы погоды и прощает мне небрежность в выращивании. Я не опытный огородник, но благодаря этому сорту я каждый год получаю хороший урожай. Спасибо, его создателям!

Владимир Сидоренко, 39 лет, г. Брянск

Сорт «Челнок» хорош для открытых грядок. Особенно радует высокая урожайность в сочетании со скороспелостью. Вкусные помидоры «Челнок» и для салатов используем и для закатки. В банке помидорки смотрятся прекрасно.

Семена Томат Челнок: описание сорта, фото

Дорогие друзья!

В таком большом ассортименте всевозможных товаров очень легко заблудиться и конечно же так много всего хочется! Но бывает, что нет возможности заказать все сразу.

Чтобы вы не потеряли понравившиеся товары и не тратили время на их поиски, мы создали для вас удобный раздел, где вы можете сохранять понравившиеся вам позиции. 

Теперь вы можете составить свой личный «Семейный Сад».

На странице нашего нового раздела у вас есть возможность создать удобные для вас списки, где будут храниться ваши планы на будущие посадки.
Сортируйте товары в списки по цене, культуре, времени посадки, по любому удобному для вас свойству.

Что-то понравилось, но хотите заказать это позже?
Создайте список, сохраните туда выбранные позиции и, когда придет время, нажмите кнопку «все товары в корзину». В правом нижнем углу будет показана общая сумма будущего заказа.

Чтобы начать, воспользуйтесь уже созданным списком «Избранное», сохраняйте в него все понравившиеся вам позиции. Если хотите создать список со своим названием, просто нажмите кнопку «Добавить новый список». Дайте ему любое название, которое вам поможет сориентироваться, например «Семена на 2016 год», «Моя клуба», «Летняя клумба» и др. И когда придет час, в несколько кликов закажите весь необходимы товар, например, для Вашего зимнего сада.    

Просматривая теперь подробное описание товара, вы можете нажать кнопку «Добавить в Мой Семейный Сад», и понравившийся товар сохранится в выбранную вами папку.

Легко, быстро, удобно! Приятных покупок!

Как пользоваться разделом Мой Семейный Сад

Для добавления товара в Мой Семейный Сад, необходимо перейти на страницу товара.

Далее необходимо перейти по ссылке Добавить в Мой Семейный Сад.

В появившимся дополнительном окне необходимо выбрать список, в который Вы хотели бы добавить текущий товар. Вы можете выбрать Новый список, задав ему название. После выбора списка необходимо перейти по ссылке «Ок».

Мой Семейный Сад
На странице раздела Вы можете просмотреть все добавленные Вами товары, а также созданные списки.

Отсюда Вы можете положить товар в корзину, как поштучно:

А также весь список:

Также Вы можете удалить товар из выбранного списка:

Или очистить весь список от товаров:

Для полного удаления списка воспользуйтесь следующей ссылкой:

Создавайте списки на различные темы. Примеры названий могут быть самыми разными: «Моя будущая летняя клумба», «Для дачи», «Яблочный сад» и множество другое. Точно знаете, что закажете из плодово-ягодных саженцев? Так и назовите список «Вкуснотища», добавив туда любимые сорта. И когда придет время, закажите весь список всего в несколько шагов.

Мы сделали все, чтобы Мой Семейный Сад был максимально удобным и понятным в использовании!

Томат «Челнок» — отзывы, фото, характеристики и описание сорта

21.12.2016

Сорт томата «Челнок» создавался специально для выращивания в открытом грунте в условиях Средней полосы России. Он был выведен Ириной Юрьевной Кондратьевой с группой соавторов и зарегистрирован в реестре селекционных достижений в 1997 году. Оригинатор сорта – НИИ селекции и семеноводства овощных культур.

Характеристики

Тип	супердетерминантный
Высота растений	до 50 см
Плоды	удлиненно-овальные, гладкие, красного цвета, массой до 55 граммов
Вкус	отличный
Срок созревания	от 82 до 120 дней
Устойчивость к болезням	данных нет

Описание

Супердетерминантный штамбовый низкорослый сорт. Максимальная высота куста – 50 см. Растения маловетвистые, среднеоблиственные. Листья промежуточного типа, среднего размера, гофрированные, темно-зеленые, с глянцевой поверхностью. По виду растения очень похожи на другой штамбовый сорт – «Ацтек».

Первое соцветие закладывается над 6 или 7 листом, последующие – через 1-2 листа, что типично для штамбовых детерминантных помидоров. Соцветие простое, плодоножка с сочленением.

На одной кисти обычно завязывается до 8 плодов массой от 23 до 55 граммов каждый. Помидоры у «Челнока» удлиненно-овальной формы с небольшим носиком на вершинке. Поверхность помидоров гладкая, цвет красный. Семенных камер – 2 или 3. Вкус хороший. Сорт предназначен для употребления в свежем виде, цельноплодного консервирования приготовления горячих блюд.

Особенности выращивания

Сорт томата «Челнок» районирован в трех регионах России:

Центральный

• Московская область;
• Тульская область;
• Смоленская область;
• Владимирская область;
• Калужская область;
• Ивановская область;
• Брянская область;
• Рязанская область.

Волго-Вятский

• Нижегородская область;
• Свердловская область;
• Пермский край;
• Республика Марий Эл;
• Удмуртская республика;
• Чувашская республика.
кировская>

Западно-Сибирский

• Кемеровская область;
• Омская область;
• Томская область;
• Тюменская область;
• Новосибирская область;
• Республика Алтай;
• Алтайский край.

Сорт предназначен для выращивания в открытом грунте. Он раннеспелый – срок от появления всходов до наступления спелости составляет 82…121 день в зависимости от температуры почвы.

Как и большинство штамбовых детерминантных сортов, «Челнок» не нуждается в пасынковании. Разумеется, лишние пасынки можно удалять, но он даст неплохой урожай, даже если не делать этого.

Схема посадки – 35…40 см х 50 см. Подробнее – в статье «Посадка томата в открытый грунт».

В реестре приведены некоторые данные по урожайности. В Центральном регионе урожайность составила от 2,26 до 2, 69 кг/м2, что 0,7…1,17 кг выше урожайности стандарта, сорта «Алпатьево 905 А». В Волго-Вятском регионе урожайность была на уровне стандартов «Непрядва» и «Солнечный» и составила 2,2…4,4 кг/м2. В Западно-Сибирском регионе урожайность сорта «Челнок» также была на уровне стандартов «Солнечный» и «Искорка» и составила 1,7…4,22 кг/м2. Рекордная урожайность была получена в Омской области – 7,92 кг товарных томатов с квадратного метра. Такая урожайность вполне достижима при высокой агротехнике.

Достоинства

• пригоден для выращивания в открытом грунте;
• низкорослый и компактный;
• раннеспелый;
• не требует подвязки и пасынкования;
• имеет хороший потенциал урожайности.

Недостатки

• кисловат на вкус.

Отзывы

Отзывы о томате «Челнок» в целом подтверждают сказанное выше: раннеспелый и простой в выращивании сорт с плодами неоднозначного вкуса. Часто успевает полностью отдать урожай до начала развития фитофтороза. В целом этот сорт можно рекомендовать всем, кто хочет выращивать томаты в открытом грунте, но может заниматься ими только по выходным.

Если вы тоже выращивали помидор «Челнок», пожалуйста, оставьте свой отзыв в комментариях к статье. Он поможет другим читателям «Усадьбы».

   

выращивание и урожайность томатов, описание сорта, отзывы

Среди множества разнообразия помидоров есть сорта, которые наиболее подходят для дачников, которые не могут похвастаться опытом выращивания овощей. Томат Челнок — яркий представитель идеального растения для начинающих огородников. Сорт достаточно вынослив и неприхотлив. Как и все овощи, томат Челнок имеет положительные и отрицательные качества.

 

Характеристика помидора

Детерминантное растение во взрослом состоянии достигает высоты 45 см. Низкорослая культура не требует подвязки и пасынкования. Помидоры Челнок целесообразно выращивать в открытом грунте, кроме того, компактный куст прекрасно развивается на балконе в объемной емкости. Первый урожай можно собрать с растения через 80-90 суток после посева семян.

Самое ценное качество описываемого представителя томатных культур — холодостойкость. Этот сорт можно разводить на любой территории России. Раннеспелые кусты радуют огородников мясистыми плодами, которые имеют удлиненно-овальную форму с носиком на конце. Овощи гладкие, красного цвета, их масса достигает 60 г (см. фото). Универсальный овощ подходит к любому виду консервирования и к употреблению в свежем виде. Вкус томатов отменный, сладковатый, с небольшой кислинкой. Такой продукт с удовольствием едят дети. На фото можно рассмотреть, что сочные помидоры наделены тремя камерами с небольшим количеством семян. Их кожица крепкая, но не жесткая, она не позволяет овощам растрескиваться.

Культура среднеустойчива к болезням, ранняя пересадка в открытый грунт поможет избежать заражения фитофторой. Медесодержащие растворы, которыми опрыскивают растение, также помогают избежать болезни. Плодоношение длится долго, завязь на растении образуется до наступления холодного периода времени.

В описание томата Челнок стоит внести еще одну положительную принадлежность — урожайность. Спелые плоды появляются с июня и радуют дачников до наступления морозов. С 1 м² несложно получить до 7-8 кг товарных овощей.

Отзывы активных людей, вырастивших данный сорт, полны восторга. Из них можно узнать, что соцветия на кустах закладываются через каждые 2 листа, Челнок незаменим для Уральского региона и Западной Сибири. Миниатюрная культура не требует особого внимания, количество зеленой массы среднее, поэтому пасынкование не нужно.

Томат «Челнок» (видео)

Правила культивирования томата Челнок

Выращивание любого овоща начинается с посева семян. Конец февраля — это самый оптимальный период для высевания посадочного материала. За несколько дней до этого мероприятия подготавливается земля для рассады. Она должна состоять из части садового грунта, хорошо вылежавшего перегноя и песка. Для обеззараживания почву достаточно прокалить или пролить водным раствором марганцовки. Кроме того, для этой цели может подойти раствор медного купороса или другой специальный продукт, приобретенный в специализированном магазине.

В готовую почву заглубляются семена, затем прикрываются слоем торфа и увлажняются. Ящик с посадками укутывается пленкой и устанавливается в теплое место. Через 6-7 дней рассада должна появиться, в этот период пленка снимается. Далее выращивание культуры происходит на хорошо освещенном месте. Оптимальная температура для роста томатов 25°С.

Вода для увлажнения рассады готовится комнатной температуры, холодная жидкость может остановить развитие молодых кустиков. Формирование 2-3 настоящих листочков на культуре должно сигнализировать о том, что подошла пора пикирования растения.

В мае рассаду переносят в открытый грунт, землю под нее лучше приготовить с осени. В каждую лунку, вместе с рассадой, вносится небольшое количество древесной золы и комплексные удобрения. Компактное растение располагается по 4 шт. на 1 м². В первые 2-4 дня после пересадки томаты защищают укрывным материалом, в таком виде они быстрее окрепнут.

Полив проводится нечасто, достаточно хорошо увлажнять растения под корень 1 раз в 6-7 дней. За весь сезон роста и развития томатам необходима подкормка комплексными удобрениями, достаточно осуществить 2-3 процедуры.

Пикируем в стаканчики рассаду томатов (видео)

описание и характеристики, особенности посадки и выращивания, болезни и вредители, достоинства и недостатки

Основные характеристики сорта:

• Авторы: Агапов А. С., Скворцова Р. В., Кондратьева И. Ю., Гуркина Л. К. (ФГБНУ Федеральный научный центр овощеводства)
• Год допущения к использованию: 1997
• Категория: сорт
• Тип роста: детерминантные
• Назначение: универсальный
• Срок созревания: ранний
• Сроки созревания, дней: 82-121
• Условия выращивания: для открытого грунта
• Товарность: высокая
• Транспортабельность: хорошая

Посмотреть все характеристики

Многие огородники стараются вырастить помидоры, которыми можно накормить не только всю семью, но также сделать заготовки на зиму. Чаще всего отдают предпочтения некапризным томатам с ранними сроками созревания, которые продуктивны, произрастая на грядках. К таким относится томат Челнок.

История выведения

Выведены помидоры Челнок группой ученых Федерального научного центра овощеводства (И. Ю. Кондратьева, Л. К. Гуркина, А. С. Агапов, Р. В. Скворцова) в 1993 г. Добавлена культура в Госреестр селекционных достижений РФ, а также допущена к использованию в 1997 году. Районирован томат по Центральному, Волго-Вятскому и Западно-Сибирскому регионам. Максимально урожайным томат себя показал, произрастая на незащищенных грунтах, однако в регионах с рискованным земледелием и коротким летом помидоры выращивают в укрытиях.

Описание сорта

Овощная культура Челнок – это низкорослое растение детерминантного типа. В среднем куст вырастает до 40-45 см, характеризуясь прямостоячим толстым стеблем с легкой опушкой, слабой ветвистостью, умеренной загущенностью темно-зеленой листвой, развитым корнем и промежуточным соцветием. Растение штамбовое, поэтому рост куста прекращается самостоятельно. Первая кисть с плодами образуется над 6-7 листом, где завязывается по 7-10 ягод.

При выращивании помидорные кусты не нуждаются в точном формировании, а также в регулярном пасынковании. Единственное, что рекомендуется делать, несмотря на низкорослость, – это подвязка, поскольку плодовые кисти тяжелые.

Назначение у помидоров универсальное. Первый, самый ранний урожай, уходит на салаты и употребление овощей в свежем виде, а далее их перерабатывают, маринуют и консервируют. Сорт идеален для цельноплодного консервирования.

Основные качества плодов

Челнок – это среднеплодный томат, масса которого составляет 23-55 граммов. Форма у овоща удлиненно-овальная с носиком на вершине, иногда перцевидная. Спелый овощ покрывается насыщенно-красным цветом. На этапе технической спелости томат имеет светло-зеленый окрас. Кожура у овоща довольно плотная, гладкая, с выраженным глянцем, но абсолютно не жесткая. Помидоры устойчивы к растрескиваниям, хорошо переносят транспортировку и могут долго храниться.

Вкусовые характеристики

У помидоров Челнок выраженные вкусовые качества. Мякоть плода мясистая, умеренно-плотная, очень сочная, но не водянистая. Вкус сбалансированный, сладковатый с легкой кислинкой. Аромат у помидоров не очень выраженный. Семян в мякоти присутствует малое количество. При поедании жесткость кожицы не чувствуется.

Созревание и плодоношение

Томаты относятся к категории ранних пасленовых. Первые томаты спеют через 82-121 день от массовой всхожести ростков. Период плодоношения растянут – он может длиться с конца июня до начала октября. Спеют томаты постепенно, поэтому кистями снимать урожай не получится. Помидоры в стадии технической зрелости могут прекрасно спеть при комнатной температуре.

Урожайность

Показатели урожайности у сорта очень хорошие. При правильном уходе культура непременно отблагодарит отменным урожаем. В каждом регионе урожаи томат дает разные. Самые высокие показатели в Волго-Вятском регионе – от 220 до 441 ц/га. В центральном и Западно-Сибирском регионах урожайность варьируется от 160 до 412 ц/г. Огородники с 1 куста за сезон снимают до 8 кг томатов.

Сроки посадки на рассаду и высадки в грунт

Помидоры выращиваются через рассаду. Посев семян проводится в первой половине марта. Перед посевом рекомендуется перебрать сеянцы, обеззаразить и обработать стимулятором роста. При температуре в помещении 22-25 градусов всхожесть наступит через 5-7 суток. На этапе появления 2-3-х настоящих листиков проводится пикирование (рассаживание растений по индивидуальным горшкам). Полив и подкормки проводятся по графику. За неделю до пересадки на грядку вносятся азотсодержащие удобрения.

Пересаживаются кустики на грядку в возрасте 2-х месяцев. Лучшим периодом считается вторая половина мая, если это открытый грунт, а в теплицу – двумя неделями раньше.

Выращивание рассады помидоров – процесс крайне важный, ведь от него во многом зависит, сможет ли садовод вообще собрать урожай. Приниматься во внимание должны все аспекты, от предпосевной подготовки до высадки в грунт.

Схема посадки

Схема размещения кустиков так же важна, как соблюдение агротехнических правил. На 1 м2 можно высаживать до 4-х кустов рассады, что позволит им получать необходимое количество кислорода и света. Высаживаются растения по схеме 70х60 см.

Посадка помидор – дело очень важное и кропотливое. Для того, чтобы получить хороший урожай томатов нужно грамотно подойти к вопросу посадки. При высадке помидор в грунт необходимо учесть много факторов — верно определить сроки, подготовить почву, правильно рассчитать расстояние между растениями, учесть правила севооборота.

Выращивание и уход

Комфортно произрастает культура в рыхлых, воздухопроницаемых и плодородных почвах, на которые в достаточном количестве попадает солнце. Почва должна быть увлажнена и иметь нейтральную кислотность. Не рекомендуется высаживать помидоры на участке, где ранее росли баклажаны или картофель.

Агротехника включает ряд мероприятий, среди которых поливы отстоянной водой, внесение органических и минеральных удобрений, прополка и рыхление почвы, подвязка кустиков, а также защита от насекомых и грибков. Кроме того, нужно контролировать влажность и сквозняки, если томаты выращиваются в теплицах.

Полив помидоров не представляет собой сложное мероприятие. После высадки растение поливают с такой периодичностью, чтобы грунт оставался влажным. В засушливую погоду, когда длительное время не идут дожди, полив может проводиться и каждый день, но обычно грядки с томатами орошают 2-3 раза в неделю.

Способы подвязки кустов томатов могут существенно варьироваться, в зависимости от наличия подручного материала, способа фиксации, а также сорта. В общем случае рекомендуются придерживаться следующей схемы: сначала прихватываются центральные стебли, а затем, по мере созревания плодов, – боковые ветви.

Одним из важных условий агротехники помидор является правильное формирование куста. Формирование томатных кустов означает выполнение следующих этапов: пасынкование, прищипывание, обрезка листьев, нормировка завязей.

На каждой стадии роста растению необходимы различные микроэлементы. Все удобрения можно разделить на две группы: минеральные и органические. Часто используют народные средства: йод, дрожжи, птичий помет, яичную скорлупу.

Важно соблюдать норму и период подкормки. Это касается и народных средств, и органических удобрений.

Устойчивость к заболеваниям и вредителям

Иммунитет у растения не очень высокий, поэтому томат восприимчив к некоторым томатным болезням. К фитофторе у сорта средняя устойчивость, поэтому о профилактических обработках забывать не стоит. Чаще всего растение страдает антракнозом и мучнистой росой. Иногда помидоры атакуют такие вредоносные насекомые, как колорадский жук, паутинный клещ, медведка и бахчевая тля. Защитой от вредителей станут опрыскивания инсектицидами.

Обработка и профилактика от заболеваний и вредителей

При выращивании томатов в теплице часто возникают заболевания из-за нарушения температурного режима и излишней влажности. Самые распространенные болезни – грибковые (фитофтороз, кладоспориоз, гнили).

Борьба с заболеваниями и вредителями томатов на открытых участках бывает довольно сложной. Это связано с тем, что пасленовые подвергаются воздействию самых разных патогенов и насекомых-вредителей.

Устойчивость к неблагоприятным погодным условиям

Стрессоустойчивость у растения достаточная, чтобы расти и плодоносить даже при резких температурных колебаниях. Помидоры не боятся непродолжительной засухи, жары и легкой затененности. Не любит культура только чрезмерной влажности, которая может привести к появлению грибков, и порывистых ветров.

Регионы выращивания

Томат способен произрастать и давать высокие урожаи практически в любых климатических условиях. Исключением считается Сибирь. В центральной и южной полосе растение растет на грядках, а в остальных регионах – под пленочными укрытиями.

Обзор отзывов

Помидоры Челнок – это один из популярных сортов неопытных дачников и фермеров, выращивающих овощи в коммерческих целях. Любовь овощеводов томат заслужил благодаря неприхотливости ухода, быстрой адаптации к условиям произрастания, отменным вкусовым и товарным качествам.

Наряду с многочисленными преимуществами, у сорта имеются некоторые недостатки. Самым существенным минусом помидоров считается их слабый иммунитет, не обеспечивающий устойчивость ко всем пасленовым болезням.

Сорт томатов Челнок, описание, характеристика и отзывы, а также особенности выращивания

Постоянно слышишь, что Россия — зона рискованного земледелия, но желающих выращивать свои фрукты и овощи меньше не становится. Просто дачники-огородники предпочтение отдают растениям, имеющим преимущество перед остальными. Сорт томата Челнок удобен в выращивании, даёт ранний урожай вкусных помидчиков, не занимает много места — находка для дачника!

История выращивания сорта томатов Челнок

Где же ещё культивировать сорт томата, полученный в Одинцовском районе, как не в Подмосковье. Но сорт пришёлся ко двору не только здесь. Томат Челнок выведен в Федеральном научном центре овощеводства и с 1997 г. внесён в Госреестр по Центральному, Волго-Вятскому и Западно-Сибирскому регионам. Рекомендуется выращивать в личных подсобных и фермерских хозяйствах, а также на садово-огородных участках. Не нуждается в сооружении укрытий, растёт в открытом грунте.

Сорт томата Челнок растёт в открытом грунте на территории от Центрального до Западно-Сибирского регионов

Описание сорта томатов Челнок

Помидоры Челнок — раннего срока созревания. После появления первых всходов требуется примерно четыре месяца, чтоб поспели плоды. При благоприятной погоде или при высадке рассады в защищённый грунт достаточно 82–95 дней. Но выращивание этого сорта томатов в теплицах нецелесообразно, так как предпочтительнее высаживать там растения индетерминантного типа, — компактный Челнок просто зря будет занимать место. Можно ускорить получение урожая, если соорудить плёночные укрытия для кустов.

Растение невысокое, с коротким устойчивым прямым штамбом. Формирует слабоветвистые кусты средней облиственности высотой до 40–45 см.

Томаты сорта Челнок формируют компактный куст

Листья средних размеров, тёмно-зелёного цвета, средней гофрированности, глянцевые. Цветки ярко-жёлтые, собраны в простые соцветия. Первые цветки закладываются над 6–7 листом, а затем через каждые 1–2 листа.

Цветки Челнока жёлтые, собраны в простые соцветия

По форме томаты продолговато-овальные, с выраженным носиком на вершине. Первые плоды немного крупнее. В среднем вес томатов колеблется в пределах 23–55 г. Кожура красная, гладкая, толстая. Мякоть плодов мясистая, плотноватая, сочная. Содержит обычно по два-три семенных гнёзда.

Мякоть томатов сорта Челнок плотная, но сочная

Томаты Челнок универсального назначения, обладают приятным вкусом с характерной кислинкой. Плоды хорошо переносят транспортировку и могут храниться. Используются в свежем виде, хороши для засолки и консервирования. Особенно часто небольшие плотные томаты этого сорта маринуют или консервируют в собственном соку. Даже очищенные от кожуры плоды не теряют форму в заготовках.

Характеристика сорта томатов Челнок

Растение детерминантного типа. Проявляет устойчивость к перепадам температуры, особенно к холодам. Из-за раннего созревания плодов почти не страдает от фитофторы, да и то чувствительность к болезни проявляют вегетативные части растения.

Когда впервые моя соседка по даче поделилась рассадой томатов, то презентовала этот сорт как «неубиваемый». Для меня, имевшей к выращиванию овощей самое отдалённое отношение, такое определение показалось явным преувеличением. Однако, Галина Пвловна настаивала: «Челнок и Ракета — вот сорта, которые устойчивы к природным катаклизмам и не боятся неопытных овощеводов». От неё я узнала. что кусты не пасынкуют. Как оказалось, и подвязывать растения не нужно, и часто поливать тоже.

При всём многообразии всего того, что было не нужно для выращивания, оказалось очень приятно собирать ранний урожай забавных крепких помидорчиков.

Сорт урожайный. В Центральном регионе получают в среднем 226–269 центнеров томата с гектара. В Волго-Вятском регионе урожайность колеблется в пределах 220–441 ц/га. В Западно-Сибирском регионе собирают 160–412 ц/га, причём наивысший урожай был собран в Омской области и составил без малого 800 ц/га.

Ценность сорта Челнок в его урожайности и раннем созревании вкусных плодов

Ценность сорта определяется:

• неприхотливостью;
• ранним сроком созревания;
• высокими вкусовыми характеристиками свежих и консервированных плодов;
• стабильной урожайностью.

Средняя восприимчивость к фитофторе со стороны стебля и листьев может расцениваться как недостаток, но это не отражается на качестве плодов.

Выращивание сорта томатов Челнок

Растения компактные и не требуют особого ухода. При посадке рассаду располагают на расстоянии не более 35–40 см. Между рядами оставляют промежуток в 50 см.

Конечно, можно попытаться вырастить рассаду самому. Для этого в конце марта или начале апреля придётся посеять пропитанные Фитоспорином семена в обеззараженный грунт, обеспечить теплом и достаточной освещённостью. Мне пришлось отказаться от этого, так как не имея балкона, не могу выделить под рассаду нужного места. Кроме того, я практиковала посев семян в рассадные стаканчики, чтобы потом не пикировать и не подвергать проростки дополнительному стрессу, а это тоже требует места. Сейчас покупаю рассаду, имея возможность выбрать самые крепкие растения.

Томаты сорта Челнок формируют невысокие кусты, их не нужно подвязывать. Периодическое рыхление поверхностного слоя почвы, прополка сорняков и полив — вот основные мероприятия по уходу за растениями. В зависимости от климатических особенностей и обилия осадков кустики томатов располагают или на грядках, или между грядками. Если лето обычно жаркое и без дождей, то кусты располагают на дне канавок между грядками. В этом случае больше влаги поступает к корням, а растения защищены от палящего солнца.

При недостатке влаги растения располагают на дне канав между грядами

Кусты достаточно обильно полить один раз за неделю. Это отлично подходит для дачников выходного дня, — не нужно беспокоиться о состоянии томатов в течение рабочей недели. Особенно важно обеспечить растения влагой во время роста и интенсивного плодоношения. В период созревания плодов полив прекращают, чтобы томаты не растрескались. Оптимальный режим полива во время созревания плодов — сразу после сбора спелых томатов. Для полива используют тёплую воду. Вода должна отстояться и прогреться, прежде чем попадёт к томатам. При этом стараются избегать попадания капель влаги на листья: лучше вносить воду под корень или подавать по канавкам.

При поливе томатов стараются не допустить попадания воды на листья

Прищипывая лишние цветки, можно добиться дружного созревания крупных плодов. Это принцип нормирования урожая. При таком подходе удобно заготавливать томаты: весь урожай созревает примерно в одни сроки.

Если не заниматься прищипкой, то получится множество плодов среднего размера, часть из которых не успеет созреть, но может быть использована в засолке. Некоторые дачники отмечают длительное плодоношение сорта, до самых холодов. С одного квадратного метра удаётся собрать при благоприятных условиях до 4–5 кг томатов.

Отдельного упоминания достойны мероприятия по предупреждению фитофторы. Под помидоры выбирают освещённые участки и располагают грядки с севера на юг. В этом случае компактные кусты Челнока будут лучше освещены в течение дня. Как правило, плоды томата этого сорта успевают созреть до того, как фитофтора поразит куст. Но для спокойствия, особенно на участках, где и так проводится профилактика медьсодержащими препаратами, можно кусты обработать 1% раствором медного купороса. Некоторые дачники проливают кусты томатов разведёнными растворами молочных продуктов (на 1 литр нежирного молока добавляют 20 капель иода и разводят 10 л воды). Можно взять просто 1% процентное молоко или молочную сыворотку, разбавить водой в соотношении 1:1 и опрыскать кусты. Применять эти растворы нужно утром при отсутствии дождей. В этом случае препарат не смоет с листьев.

При выращивании томатов важно соблюдать севооборот. Не стоит забывать, что картофель, перец, баклажаны и томаты относятся к семейству паслёновых, поэтому вредители и болезни у них общие. Нельзя высаживать томаты там, где до этого росли представители своего семейства. Наиболее предпочтительны в качестве предшественников для томата бобовые: фасоль, горох, бобы. Эти растения хороши ещё тем, что отгоняют кротов. Почему-то вездесущим зверькам неприятно соседство с бобовыми. Если нет желания заниматься севооборотом, стоит подумать о сидератах. Сразу после сбора урожая томата рекомендуется перекопать этот участок и засеять белой горчицей. До наступления холодов подросшую зелень необходимо вкопать в землю. Эта несложная манипуляция предотвратит распространение сорняков на участке и позволит обеззаразить почву. Кроме того, грунт под горчицей становится очень рыхлым и удобным для дальнейшего использования.

Любители томатов не всегда имеют земельные участки. Небольшие размеры кустов позволяют выращивать эти неприхотливые растения и в кадках на балконе. Нарядный компактный кустик, увешанный яркими плодами, поставляет свежайшие помидоры к столу и очень декоративен.

Томаты Челнок и Загадка, растущие на балконе, радуют глаз и обеспечивают свежими витаминами

Отзывы

Узенькие проворные челны мореходов сновали по водным участкам, где было невозможно пройти крупным шхунам. Так и изящные продолговатые плоды томатов Челнок аккуратно размещаются в банке, экономя пространство и даря заготовкам насыщенный вкус лета.

Оцените статью:

[Голосов: Среднее: ]

⋆ Характеристики помидоров-челноков ⋆ 🌼Farmer

Помидоры относятся к таким овощам, без которых невозможно представить огород. Каждая хозяйка с удовольствием выращивает помидоры разных сортов. Но большой популярностью пользуется помидор-челнок. Он имеет высокую пищевую ценность, богат витаминами и минералами. Отлично подходит для приготовления разнообразных блюд.

Содержание

1. Описание томатов Shuttle
2. Выращивание сортов
3. Посадка семян
4. Рассада
5. Высаживание сорта в открытый грунт
6. Уход за томатами
7. Болезни и насекомые, влияющие на Shuttle

   3

8. Заключение Характеристика томатов челнока

   Томаты челнока в современном мире часто встречаются на грядках.Легко выращивать и ухаживать. Из-за небольшого размера плодовой рамки его часто используют для консервации целиком. Помидоры Челнок и характеристики этого сорта часто обсуждаются садоводами и владельцами ферм из-за преимуществ его плодов.

   Описание томатов Shuttle

   Tomato Shuttle относится к раннеспелым сортам, выращивать их могут даже неопытные люди. Они хорошо реабилитируются в любых условиях и не прихотливы в уходе. Именно описание сорта часто привлекает садоводов.Куст небольшой, в высоту может достигать максимум 55 см.

   В плодах минимум воды и много мякоти. Помидоры имеют овальную форму. Кожура у помидора плотная, приятного красного цвета. Вес одного плода может достигать максимум 60 г.

   Урожайность этого сорта достаточно высокая, поэтому с одного квадратного метра можно получить более 8 кг помидоров. Первые плоды на кусте появляются через 90 дней. Многие садоводы, хоть раз посадившие этот сорт, оставляют о нем только положительные отзывы.

   Выращивание сорта

   Tomato Shuttle — отличный вид, который подходит новичкам в этом деле. Выращивание этого сорта не требует много времени и сил. В то же время уход за эму минимален. Но чтобы посадить Челнок в открытый грунт, нужно сразу обзавестись рассадой. А для этого следует посеять семена.

   Посадка семян

   Для того, чтобы посадить помидоры челнока, необходимо провести ряд подготовительных мероприятий. В первую очередь следует выбрать емкость.Он должен быть достаточно широким, а глубина должна быть примерно 50 см. Почва, в которую будут посажены семена, также играет большую роль. Для этого сорта лучше брать дренированный высокопитательный грунт.

   Чтобы семена приняли и не потерялись в почве, необходимо их подготовить. Для этого их необходимо продезинфицировать в специальном растворе. Его получают путем смешивания перекиси с водой. После этого семена следует замочить в этом растворе на 1 сутки и на сутки положить на влажную ткань.Далее можно смело сажать помидоры Шаттл.

   В описании сорта сказано, что делать это надо так:

   • в таре делаем грядки;
   • их глубина должна быть не более 2 см;
   • ширина между пазами не более 7 см;
   • сеять семена в лунки;
   • затем засыпаем их грунтом.

   После посадки семена необходимо хорошо полить и накрыть полиэтиленовым пакетом.В таком состоянии они должны присутствовать до появления первых ростков. После того, как семена вылупятся, пакет снимается. Когда саженцы дадут две полные листочки, необходимо ее собирать. Пересаживая в отдельные емкости.

   Далее, сорт томатов Шаттл нуждается в правильном уходе. Это необходимо сделать, как указано в описании.

   Уход за рассадой

   Помидоры необходимо регулярно поливать и проветривать. Воду следует вносить в почву, когда почва высохнет.Полив желательно проводить не водопроводной водой, а дождем. Емкости с рассадой следует располагать в помещении, где температура воздуха 23 градуса.

   Опытные садоводы также рекомендуют дополнительное освещение рассады. Действительно, в конце февраля — начале марта у них еще мало дневного света. Для этого используется люминесцентная лампа. В подкормках саженец не нуждается.

   Сорт высаживаем в открытый грунт

   Перед тем, как переместить помидоры Челнок в открытый грунт, необходимо их закалить.Во многих отзывах написано, что это нужно делать, когда температура на улице будет постоянно держаться выше 8 градусов. Ежедневно нужно вывозить рассаду на улицу на 10-15 минут. Помидоры можно пересаживать в открытый грунт только при температуре почвы выше 12 градусов.

   Сажать рассаду лучше всего в пасмурный день или днем. В таких условиях культура лучше выживает. Расстояние между грядками и кустами должно быть 35 см. Рядом с кустом нужно забить колышек.Его высота должна быть на 10 см больше взрослого куста.

   После чего необходимо хорошо залить водой емкости с рассадой сорта. Затем аккуратно достаньте рассаду и переместите в открытый грунт. После этого помидоры-челноки следует хорошо полить.

   Уход за помидорами

   Выращивание помидора принесет результат только в том случае, если его правильно оставить. Несмотря на то, что характеристики сорта говорят о том, что в особом уходе он не нуждается. Отзывы говорят об обратном, ведь помидоры-челноки еще нужно поливать и удобрять.Также при выявлении и борьбе с вредителями и болезнями.

   Только правильный уход может обеспечить высокие урожаи. А он заключается в следующем:

   • томатов нужно регулярно поливать и удобрять;
   • почву мульчировать;
   • удаление сорняков.

   Челночные помидоры — это сорт, который требует правильного полива. Есть даже особая схема внесения воды в почву. Первый полив после посадки в открытый грунт проводят в день посадки.Чем чаще в почву вносится вода, тем быстрее всходы приживутся. Особое внимание стоит уделить растению в момент созревания.

   В этот период не переборщите с водой. Ведь если добавить слишком много жидкости, то помидоры начнут гнить и трескаться, а если добавить воды, они просто не созреют до конца. В этот период растение следует поливать один раз в семь дней.

   Также неотъемлемой частью правильного ухода является внесение удобрений.Они позволяют помидорам-челнокам затвердеть. В первый раз подкормку проводят ровно через 12 дней после посадки рассады. Затем удобряйте помидоры каждые 10 дней. Для этого можно брать как органические, так и неорганические продукты.

   Чтобы растение не боялось перепадов температур, его можно закалить. Это делается с использованием борной кислоты. Если этого нет под рукой, можно заменить на Яичник.

   Болезни и насекомые, поражающие Shuttle

   Выращивание разновидностей не может происходить без повреждений от болезней и насекомых.Чтобы предотвратить такую ​​неприятность, необходимо их предотвратить, но для начала нужно выяснить, какие вредители и недуги любят этот сорт помидор. Томатный челнок легко переносит любые погодные условия, но не разные напасти в виде насекомых и болезней.

   Наиболее частым заболеванием этого растения является фитофтороз. Поражает растение полностью, от листьев до плодов. Появляется из-за большого количества влаги. Есть еще несколько опасных для помидоров недугов, таких как антракоз и мучнистая роса.Чтобы уберечь культуру от подобных напастей, необходимо провести профилактику фунгицидами и обеспечить за ней надлежащий уход.

   Вредители челнока — медведь, тля, колорадский жук и клещи. Бороться с насекомыми можно с помощью специальных препаратов или народных средств. Чтобы избежать их появления, рядом с помидором рекомендуется сажать растения, отпугивающие паразитов.

   Заключение

   Tomato Shuttle — один из хороших сортов, которые часто выращивают в домашних условиях.Сделать это совсем не сложно, главное получить нужные семена и получить рассаду. А дальше все зависит от ухода за помидором.

   Эта культура, как и другие сорта, может поражаться различными болезнями и насекомыми. Поэтому для предотвращения этого необходима профилактика.

   Семена томатов из космоса вырастают в створки: наука: в меморандуме НАСА говорится, что семена, полученные со спутника и распространенные в школах по всей стране для экспериментов, подверглись воздействию космического излучения.Считается, что существует небольшая опасность мутаций.

   Внутренняя записка, написанная подрядчиком НАСА, предупреждает, что семена томатов, высаженные по всей стране студентами-естественниками в рамках эксперимента космического агентства, подверглись воздействию космической радиации, которая могла произвести ядовитые помидоры.

   Хотя в неподписанной записке, полученной The Times, опасность описывается как «отдаленная», в ней сообщается, что директор по исследованиям в Park Seed Co., которая поставляла семена НАСА, «по-видимому, выступает против» употребления в пищу помидоров.

   Однако такое предупреждение не было включено в учебные материалы или пресс-релизы, разосланные 180 000 учителям, участвующим в эксперименте, призванном пробудить интерес к науке и космосу, предоставив 4 миллионам учащихся возможность изучать влияние долгосрочного пространства. воздействие на живую ткань.

   Отвечая на вопрос о программе семян в четверг, официальные лица НАСА признали, что существует «бесконечно малый» риск токсичных томатов, но они поддержали решение не предупреждать учителей и студентов о потреблении экспериментального урожая.Они сказали, что в рамках научного эксперимента помидоры все равно есть нельзя.

   Двухстраничный меморандум, описанный Фрэнком Оуэнсом, заместителем директора отдела по вопросам образования НАСА, как «не официальный меморандум НАСА», был отправлен, по-видимому, по ошибке около двух недель назад в Центр учебных материалов НАСА / Лаборатории реактивного движения в Лос-Анджелесе. Кресента.Средство распространяет семена и учебные материалы среди участников в Южной Калифорнии.

   Он был написан Нельсоном Эрлихом, заместителем директора программы услуг аэрокосмического образования в Университете штата Оклахома, который курирует школьные программы НАСА.

   «Существует небольшая вероятность, — говорится в записке, — что мутации, вызванные радиацией, могут привести к тому, что растения будут давать ядовитые плоды».

   Уровни радиации в космосе выше, чем на Земле, и ученые заявили, что теоретически возможно, что генетический состав семян мог быть изменен и мог дать ядовитые плоды.

   Эрлих заявил в четверг, что меморандум был предназначен для предоставления «справочной информации» примерно для 30 сотрудников, которые посещают школы по всей стране, чтобы сделать презентации о НАСА и космической программе.Он сказал, что это было сделано, чтобы помочь им ответить на вопросы о семенах томатов.

   «Это не было предназначено для того, чтобы выбраться так, как это произошло», — сказал Эрлих. «Несмотря на то, что такая возможность есть, она крайне мала. У людей не должно быть страхов ».

   Тем не менее, по крайней мере одна участница эксперимента из Лос-Анджелеса решила бросить учебу из-за предупреждения, и представитель программы городского садоводства при Калифорнийском университете кооперативов в Лос-Анджелесе сказал, что она рекомендует, чтобы начальные школы не становились вовлеченный.

   «Я считаю, что это отличный проект, но я не могу рекомендовать его другим школам только из соображений безопасности», — сказала Рэйчел Маби, координатор молодежного садоводства программы Common Ground Garden. «Дети будут есть все, что они растут».

   Эксперимент НАСА по экспонированию из космоса, разработанный для студентов (SEEDS), был одним из 57 экспериментов, проведенных на борту 11-тонного спутника, запущенного шесть лет назад космическим кораблем «Челленджер». Около 12,5 миллионов семян хранились на борту в пяти герметичных алюминиевых канистрах.Спутник был найден в январе шаттлом «Колумбия», и семена начали поступать в обращение.

   Участникам программы — от учеников начальной школы до студентов колледжей — были розданы семена «открытого космоса», а также контрольные семена, которые никогда не покидали Землю. Студенты должны вырастить оба набора семян и отслеживать любые различия, сообщая НАСА в июне.

   Гилберт Янов, возглавляющий образовательные программы центра JPL, сказал, что его офис распространил памятку только «горстке» учителей, которые собирали свои семена и материалы в Ла-Кресенте.Большинство учителей в районе Лос-Анджелеса получали свои семена и информацию по почте от НАСА и Park Seed.

   «Я, вероятно, буду одним из первых, кто их съест», — сказал Янов, который сам выращивает пакет с семенами. «Но я не думаю, что мне следует что-то скрывать от учителей. Все, что я получаю из штаба, я должен передать ».

   Чиновники Barnsdall Art Park, голливудского центра искусств и отдыха, находящегося в ведении Лос-Анджелеса, решили отказаться от эксперимента после того, как на этой неделе взяли копию меморандума.Специальная церемония посадки была запланирована на среду для детей из класса внешкольного образования и их родителей, но чиновники заменили космические семена горшечными саженцами в последнюю минуту.

   «Я просто не мог поверить, что их будут раздавать детям, чтобы они росли с таким потенциалом катастрофы», — сказал Ричард Стретц, координатор образования в парке. «Я сразу же вышла во время обеденного перерыва и купила 12 разных видов помидоров в горшках, и мы посадили их вместо них.

   Не все учителя выразили тревогу, когда узнали о ситуации. В долине Сан-Хоакин, сердце производства томатов в Калифорнии, учителя сказали, что их не беспокоит появление помидоров-мутантов. Кен Сели, учитель шестого класса в Терлоке, сказал, что ученики выращивают космические семена с 12 марта, и многие из них заберут небольшие растения домой в течение следующих нескольких недель.

   «Когда мы его приготовим, у нас будет общий салат и всякая всячина», — сказал Сели.«Мы не только собираемся их есть, но и заключили контракт с крупной коммерческой семеноводческой компанией на сушку некоторых наших фруктов, чтобы у нас были семена второго и третьего поколения».

   Эксперт по биотехнологиям из Министерства сельского хозяйства США в Вашингтоне сказал, что НАСА запросило совета у его агентства и Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов по поводу безопасности эксперимента с семенами.

   Элвин Л. Янг, директор отдела сельскохозяйственной биотехнологии, сказал, что оба агентства заверили НАСА, что эксперимент «не должен представлять опасности для пищевых продуктов.

   Янг сказал, что, тем не менее, он порекомендовал космическому агентству запретить учителям и студентам есть помидоры, потому что «все, что мы делаем, сопряжено с риском».

   НАСА отвергло эту идею, опасаясь, что она «подаст неверный сигнал», заставив людей «подумать, что с помидорами что-то не так», — сказал Янг. Фактически, в руководстве для учителя прямо говорится, что «семена, полученные из космоса, не представляют опасности для здоровья».

   Джим Алстон, директор по исследованиям в Park Seed из Южной Каролины, сказал, что идея распространения предупреждения была рассмотрена и отвергнута.

   «Если вы скажете, не ешьте их, это напугает людей», — сказал Олстон. «Мы решили, что если мы заявляем, что это научный эксперимент, то это так».

   Оуэнс из НАСА, который сказал, что не знал, что было предусмотрено предупреждение, охарактеризовал многообещающую реакцию на меморандум как «небольшую истерику».

   «Это понятно, когда люди думают о радиоактивных материалах, включая Три-Майл-Айленд и все такое», — сказал он. «Но в этом случае НАСА сделало все возможное, чтобы определить, что это безопасный эксперимент.”

   Он сказал, что вопрос поедания помидоров должен быть спорным: «Как человек, проводящий исследования, я бы не стал экспериментировать с поеданием фруктов. Я думаю, это самоочевидно ».

   Олстон заявил в четверг, что он все равно намерен съесть помидоры, потому что шанс укусить ядовитый «настолько мал, что почти невозможен».

   Однако он не стал бы заходить так далеко, чтобы рекомендовать другим есть их.

   «Есть надуманная возможность того, что какая-то мутация что-то изменила в генетическом материале.. . плода, — сказал он. «Из-за видимости этой вещи, кто-то там будет искать легкие деньги:« Я съел этот помидор и заболел, и я собираюсь подать в суд на миллион долларов ». По этой причине мы не рекомендовать их есть ».

   Винсент Рубацки, специалист по овощам из Калифорнийского университета в Дэвисе, сказал, что размещение семян в космосе увеличивает вероятность радиационно-индуцированных мутаций, потому что семена больше не имеют защиты атмосферы Земли.Однако он сказал, что вероятность того, что космическое излучение вызовет мутацию, составляет «один из нескольких миллионов», и еще менее вероятно, что оно вызовет токсическую мутацию.

   «Даже если бы это было так, это было бы очень легко определить», — сказал Рубацки. «Если вы попробуете его, и оно будет на вкус как мясо скунса, это будет очень очевидно».

   В создании этой истории участвовал независимый писатель Тедди Колбер.

   Дополнение: Lentiviral-S-tdTomato

   Эти плазмиды созданы вашими коллегами.Пожалуйста, примите во внимание Главный исследователь, процитируйте статью, в которой были описаны плазмиды: и включите Addgene в Материалы и методы ваших будущих публикаций.

   • Для вашего Материалы и методы раздел:

     Лентивирус-С-тд был подарком от Джеффри Ротштейн (Плазмида Addgene № 112579; http: // n2t.сеть / addgene: 112579; RRID: Addgene_112579)

   • Для вашего Ссылки раздел:

     Экспансия повтора C9orf72 нарушает ядерно-цитоплазматический транспорт .Zhang K, Donnelly CJ, Haeusler AR, Grima JC, Machamer JB, Steinwald P, Daley EL, Miller SJ, Cunningham KM, Vidensky S, Gupta S, Thomas MA, Hong I, Chiu SL, Huganir RL, Ostrow LW, Matunis MJ , Ван Дж., Саттлер Р., Ллойд Т. Э., Ротштейн Дж. Д.. Природа. 2015 3 сентября; 525 (7567): 56-61. DOI: 10,1038 / природа14973. Epub 2015 26 августа 10.1038 / природа14973 PubMed 26308891

   Первая шаттл-система для болгарского перца в Австралии

   Katunga Fresh Produce, изначально занимавшаяся выращиванием помидоров на юго-востоке Австралии, представляет собой сплоченный семейный бизнес, где каждый вносит свой вклад.Это гарантирует, что овощи будут выращиваться наивысшего качества с наилучшими вкусовыми качествами и долгим сроком хранения. В ответ на большой спрос на австралийском рынке, Katunga в этом году начала выращивать перцы трех цветов.

   Первая система в Австралии
   Чтобы обеспечить бесперебойную уборку и транспортировку этого нового урожая, компания Steenks Service из De Lier недавно поставила систему челнока для болгарского перца. Разница расстояний составляет 16 522 км по прямой, но это никогда не было препятствием.Katunga Fresh — первый австралийский производитель, использующий эту систему.

   Сандер Зуиджест, совладелец Steenks Service: «Это первая в Австралии система шаттла для болгарского перца, поставленная на данный момент, и мы гордимся этим. Эта система обеспечивает значительную экономию труда и большую эффективность при уборке урожая и транспортировке»

   Как работает челночная система
   При уборке на высоте пустой контейнер автоматически перемещается вместе с платформой тележки с трубопроводами.Сам челнок остается внизу ходовой части. Когда контейнер будет заполнен, тележка с трубопроводами снова опустится. Затем полный контейнер подключается к шаттлу, после чего работа может продолжаться с пустым контейнером.

   Челноки с полными контейнерами соединяются вместе с электрическим эвакуатором AGV, который автоматически едет в зону сортировки по индукционной дорожке для опорожнения. Таким образом, процесс производства намного проще, и перец меньше повреждается.

   Для получения дополнительной информации:
   Katunga Fresh Produce
   1055 Numurkah Rd
   Katunga VIC 3640
   Australia
   E: [email protected]

   Steenks Service
   Ян ван де Лаарвег 1
   2678 LH De Lier
   Нидерланды
   E: [email protected]
   W: www.steenks-service.nl

   Работа водителей шаттла

   ярдов в Лос-Баньосе в The Morning Star Company

   Описание компании

   Компания Morning Star Packing Company имеет три предприятия, два из которых находятся в Лос-Баньосе, Калифорния, а одно — в Уильямсе, Калифорния.Компания занимается переработкой и упаковкой томатов с 1970 года. Компания полностью полагается на помидоры и успешно стала крупнейшим производителем в мире. Самые распространенные продукты — это томатная паста и нарезанные кубиками помидоры. Продукты с массовыми ингредиентами продаются производителям пищевых продуктов, а пакетированная упаковка и готовая продукция доступны для предприятий общественного питания и розничной торговли. Руководствуясь миссией экологически ответственного производства высококачественных томатов и продуктов из них, компания первой внесла изменения в технологию производства.Возможности трудоустройства в Morningstar открыты для таких должностей, как механики, сотрудники по отправке и приемке, водители грузовиков-челноков, механики по производству барабанов, координатор по работе с клиентами, техническое обслуживание завода, сотрудники службы безопасности, механики и помощники по упаковке, механики по консервированию и упаковке, руководители кадровых служб и т. Д. . Доступны как полная, так и неполная занятость.

   Описание работы

   Описание компании

   Компания Morning Star и ее дочерние компании управляют тремя заводами по переработке томатов в Калифорнии, обрабатывая от 25% до 30% урожая Калифорнии, а также осуществляя операции по пересадке, сбору урожая и транспортировке томатов.Около 400 сотрудников работают круглый год и работают более 2000 сезонных сотрудников, а годовой объем продаж составляет около 1 миллиарда долларов.

   Описание работы

   Morning Star теперь нанимает водителей автодомов для предстоящего сезона! Вам не нужны специальные права, но вы все равно получите ценный опыт вождения больших транспортных средств. Если к 1 июля вам исполнится 18 лет, подайте заявку сегодня!
   

   • Опыт не требуется
   • Сезон длится примерно с июля по октябрь
   • 40+ часов в неделю
   • 15 $ / час от
   • Se habla Espanol

   Дополнительная информация

   Вся ваша информация будет храниться в тайне в соответствии с директивами EEO.Компания Morning Star и ее дочерние компании участвуют в E-Verify.

   Зарегистрироваться новые вакансии размещаются ежедневно

   Эта вакансия была опубликована 21 июля 2021 г. и истекла 6 августа 2021 г.

   Минимум 34 168 долл. США

   43 032 долл. США средний

   Максимум 50 759 долл. США

   Задачи

   • Получать деньги от клиентов, вносить изменения и записывать транзакции в квитанции клиентов.
   • Управляйте грузовиками, чтобы доставить такие товары, как продукты питания, медикаменты или газеты.
   • Напишите заказы клиентов и договоры купли-продажи в соответствии с инструкциями компании.
   • Информируйте постоянных клиентов о новых продуктах или услугах, а также об изменении цен.
   • Выслушивайте и разрешайте жалобы клиентов на продукты или услуги.
   • Записывайте информацию о продажах или поставках в ежедневные записи о продажах или поставках.
   • Позвоните потенциальным клиентам, чтобы рассказать об услугах компании или предложить новый бизнес.
   • Организуйте демонстрацию товаров и рекламных материалов или выпускайте рекламные материалы для клиентов.
   • Уход за грузовиками и оборудованием для раздачи пищевых продуктов, а также чистка внутри машин для раздачи продуктов питания или напитков.
   • Изучите списки дилеров, клиентов или станций доставки и погрузки грузовиков.
   • Продавайте деликатесы, такие как бутерброды и напитки, офисным работникам и спонсорам спортивных мероприятий.
   • Собирайте монеты из торговых автоматов, заправочных автоматов и убирайте старые товары.

   Навыки

   • Активное слушание — уделять все внимание тому, что говорят другие люди, находить время, чтобы понять высказанные мысли, задавать вопросы по мере необходимости и не перебивать в неподходящее время.
   • Разговорная речь — разговор с другими для эффективной передачи информации.
   • Критическое мышление — Использование логики и рассуждений для определения сильных и слабых сторон альтернативных решений, выводов или подходов к проблемам.
   • Социальная восприимчивость — осознавать реакции других и понимать, почему они реагируют именно так.
   • Убеждение — Убеждение других изменить свое мнение или поведение.
   • Сервисная ориентация — Активно ищет способы помочь людям.

   Знания

   • Обслуживание клиентов и персональное обслуживание — Знание принципов и процессов предоставления услуг клиентам и персоналом. Это включает в себя оценку потребностей клиентов, соблюдение стандартов качества услуг и оценку удовлетворенности клиентов.
   • Транспортировка — Знание принципов и методов перемещения людей или товаров по воздуху, железной дороге, морю или дороге, включая относительные затраты и выгоды.

   Компания «Утренняя звезда»

   Описание

   У Morning Star Packing Company три предприятия, два из которых находятся в Лос-Баньосе, Калифорния, а одно — в Уильямсе, Калифорния. Компания занимается переработкой и упаковкой томатов с 1970 года. Компания полностью полагается на помидоры и успешно стала крупнейшим производителем в мире. Самые распространенные продукты — это томатная паста и нарезанные кубиками помидоры. Продукты с массовыми ингредиентами продаются производителям пищевых продуктов, а пакетированная упаковка и готовая продукция доступны для предприятий общественного питания и розничной торговли.Руководствуясь миссией экологически ответственного производства высококачественных томатов и продуктов из них, компания первой внесла изменения в технологию производства. Возможности трудоустройства в Morningstar открыты для таких должностей, как механики, сотрудники по отправке и приемке, водители грузовиков-челноков, механики по производству барабанов, координатор по работе с клиентами, техническое обслуживание завода, сотрудники службы безопасности, механики и помощники по упаковке, механики по консервированию и упаковке, руководители кадровых служб и т. Д. . Доступны как полная, так и неполная занятость.

   Расположение

   13448 Volta Rd. Лос-Баньос, Калифорния, 93635 и другие

   Промышленность

   Транспорт / Логистика Ресторан / Общественное питание

   Всего объявлений о вакансиях за прошлые

   На основе 130 досок объявлений дублирование исключено

   5 недель

   Средний срок службы

   Общее количество размещенных вакансий за прошлые периоды

   На основе 130 досок объявлений дублирование исключено

   Категория должности	Распределение	6 месяцев	1 год
   Финансы	15.4%	8%	1,050%
   Строительство	12,1%	50%	50%
   Продажи	11.4%	13%	42%
   Транспорт и логистика	10,7%	86%	1,400%
   Производство	10.1%	33%	33%
   Административный	6,7%	67%	17%
   Юридический	5.4%	33%	700%
   Маркетинг и PR	5,4%	67%	33%
   Продовольственные услуги	5.4%	100%	33%
   Исполнительная дирекция	5,4%	100%	33%
   Розничная торговля	4.0%	100%	50%
   Консультации и высшее руководство	4,0%	80%	50%
   Защитные услуги	2.0%	100%	75%
   Обслуживание клиентов	1,3%	100%	83%
   Другой	0.7%	83%	92%

   КООРДИНАТОР СЧЕТА КЛИЕНТА Координатор по работе с клиентами Описание компании Компания Morning Star и ее дочерние компании управляют тремя заводами по переработке томатов в Центральной Калифорнии, обрабатывая от 35% до 40% урожая томатов Калифорнии, помимо операций по пересадке, сбору урожая и транспортировке томатов…. Прочитайте больше Ведущий повар Line Cooks: свинец, бройлер и соте Отель Mission De Oro расположен в Санта-Нелла, штат Калифорния, рядом с шоссе I-5, в самом сердце тихого и красивого района Северной Калифорнии. Кухня в The Mission предлагает изысканные блюда в непринужденной семейной обстановке. Выделение… Прочитайте больше Оператор грузоподъемника Описание компании Компания Morning Star Company и ее дочерние компании управляют тремя заводами по переработке томатов в Центральной Калифорнии, обрабатывая от 35% до 40% урожая томатов Калифорнии, в дополнение к операциям по пересадке, сбору урожая и транспортировке томатов.В компании работает … Прочитайте больше Менеджер отеля Управляющий отелем (Fast Track) Санта-Нелла, Калифорния 95322, США, штат Калифорния Описание компании Удобное расположение этой достопримечательности, расположенной в золотых предгорьях Калифорнии, служит идеальной остановкой для путешественников, направляющихся куда угодно из Вашингтона, Орегона, Сан-Франциско, Северной Калифорнии в Лос-Анджелес. Анхелес, … Прочитайте больше Водитель шаттла во дворе Описание компании Компания Morning Star Company и ее дочерние компании управляют тремя заводами по переработке томатов в Центральной Калифорнии, обрабатывая от 35% до 40% урожая томатов Калифорнии, в дополнение к операциям по пересадке, сбору урожая и транспортировке томатов.В компании работает … Прочитайте больше Офицер собственной безопасности — Охранник Компания «Утренняя звезда» Лос-Баньос, Калифорния Описание компании Компания Morning Star и ее дочерние компании управляют тремя заводами по переработке томатов в Центральной Калифорнии, перерабатывая от 25% до 30% урожая Калифорнии, а также помидоры. Прочитайте больше Коллега по расчету заработной платы и бухгалтерии Компания «Утренняя звезда» Калифорния, Калифорния Миссия этого коллеги будет заключаться в поддержании конкурентной позиции предприятия как «предпочтительного работодателя» путем тщательного изучения компенсаций и льгот и обеспечения безупречного соблюдения требований. Прочитайте больше Опытный продавец ингредиентов Компания «Утренняя звезда» Лос-Баньос, Калифорния Описание компании The Morning Star Company и ее дочерние компании управляют тремя заводами по переработке томатов в Центральной Калифорнии, перерабатывая от 25% до 30% урожая Калифорнии, а также помидоры. Прочитайте больше Коллега по продажам ингредиентов Компания «Утренняя звезда» Лос-Баньос, Калифорния Компания The Morning Star Company и ее дочерние компании управляют тремя заводами по переработке томатов в Центральной Калифорнии, обрабатывая от 25% до 30% урожая Калифорнии, а также занимаясь пересадкой томатов, Прочитайте больше

   границ | Белок вируса курчавости желтых листьев томата V2 играет решающую роль в ядерном экспорте белка V1 и вирусной системной инфекции

   Введение

   Геминивирусы — это группа вирусов растений с кольцевым одноцепочечным геномом ДНК.Вирусы этого семейства вызывают разрушительные заболевания сельскохозяйственных культур, приводящие к потерям сельскохозяйственных культур во всем мире (Nakhla and Maxwell, 1997; Moriones and Navas-Castillo, 2000; Gafni, 2003; Fauquet et al., 2008; Glick et al., 2009; Fondong). , 2019; Zeng et al., 2020). В то время как синтез вирусного белка происходит в цитоплазме, репликация геминивирусов происходит в ядре инфицированных клеток-хозяев (Hanley-Bowdoin et al., 2013). Очень важно, чтобы вирусные белки, участвующие в этой репликации, попадали в ядро ​​для выполнения своих функций.Кроме того, вновь синтезированная вирусная геномная ДНК экспортируется из ядра в цитоплазму для дальнейшего распространения в соседние клетки с последующей системной инфекцией посредством перемещения на большие расстояния. Следовательно, ядерно-цитоплазматический перенос белков геминивируса и геномной ДНК имеет большое значение для вирусной системной инфекции, и лучшее понимание этого процесса потенциально может предоставить новые стратегии борьбы с вирусными инфекциями.

   Геминивирусы можно разделить на две основные группы в зависимости от их геномных компонентов: одна группа — это одночастные геминивирусы, а другая группа — двудольные геминивирусы (Hanley-Bowdoin et al., 2013). Для движения двудольных геминивирусов необходимы два белка, BV1 и BC1, которые кодируются ДНК-B (Brough et al., 1988; Etessami et al., 1988; Padidam et al., 1995; Jeffrey et al., 1996; Sudarshana). et al., 1998). BV1 является ядерным челночным белком и играет важную роль в ядерно-цитоплазматическом перемещении вирусной геномной ДНК; BC1 способствует перемещению от клетки к клетке (Brough et al., 1988; Etessami et al., 1988; Jeffrey et al., 1996; Sudarshana et al., 1998; Lazarowitz and Beachy, 1999).

   Геном однораздельных геминивирусов содержит только один компонент — ДНК-А. Возможный механизм перемещения вирусной геномной ДНК между ядром и цитоплазмой неясен, даже несмотря на то, что было исследовано несколько монодостаточных геминивирусов, таких как вирус кукурузной полосы (MSV) и вирус желтого листа томата (TYLCV) (Liu et al. др., 2001; Рохас и др., 2001; Гафни, Эпель, 2002; Горовиц и др., 2016). Сообщалось, что белок V1, который является белком оболочки (CP) TYLCV, связывается и перемещает вирусную геномную ДНК между ядром и цитоплазмой в дополнение к их упаковке в вирусные частицы на более поздней стадии (Boulton et al., 1989, 1993; Лазаровиц и Бичи, 1999). Позже сообщалось, что для этого процесса также необходимы белки-хозяева. Рецептор ядерного импорта кариоферин α1 (KAPα) помогает TYLCV проникать в ядро ​​(Kunik et al., 1999; Yaakov et al., 2011), HSP70 (белок теплового шока) важен для шаттла TYLCV CP из цитоплазмы в ядро ​​(Gorovits et al. ., 2016; Gorovits, Czosnek, 2017), а экспортин-α необходим для ядерного экспорта белка C4 вируса Юньнань скручиваемости листьев томата (TLCYnV) (Mei et al., 2018). Кроме того, в переносе ядер однораздельных геминивирусов также участвуют вирусные белки, отличные от белка V1, такие как белок C4 или V2, что позволяет предположить, что может быть задействован белковый комплекс (Rojas et al., 2001, 2005; Mei et al., 2018). Однако неясно, какие вирусные белки и как они работают вместе, чтобы осуществить транспорт между ядром и цитоплазмой.

   Вирус желтого скручивания листьев томата — типичный однораздельный бегомовирус семейства Geminiviridae .Геном одноцепочечной (ss) ДНК имеет шесть открытых рамок считывания (ORF) и межгенную область (IR). Две ORF (V1 и V2) расположены на вирусной цепи, а другие четыре ORF (C1, C2, C3 и C4) расположены на комплементарной цепи (Navot et al., 1991). Среди них белок V1 облегчает сборку вирионов и перенос вирусов (Gafni, 2003; Rojas et al., 2001; Díaz-Pendón et al., 2010; Scholthof et al., 2011). Для ядерно-цитоплазматического транспорта TYLCV белок V1 хорошо известен как ядерный челночный белок и благодаря своей роли в связывании вирусной геномной ДНК (Kunik et al., 1998, 1999; Паланичелвам и др., 1998; Рохас и др., 2001). Однако несколько линий доказательств предполагают, что другие вирусные белки, такие как V2, также вовлечены (Kunik et al., 1999; Rojas et al., 2001; Jeske, 2009; Fondong, 2013; Hanley-Bowdoin et al., 2013 ; Саху и др., 2014). Рохас и др. (2001) обнаружили, что эффективность ядерного экспорта вирусной ДНК увеличивалась на 20-30% в присутствии белка V2, предполагая роль белка V2 в ядерном экспорте вирусной геномной ДНК, опосредованном белком V1.Однако механизм, посредством которого белок V2 способствует V1-опосредованному перемещению вирусной геномной ДНК из ядра, неизвестен.

   В этом исследовании мы демонстрируем, что белок V2 влияет на субклеточную локализацию белка V1, резко уменьшая локализованный в ядре белок V1 в клетках Nicotiana benthamiana , возможно, через экспортин-α хозяина (XPO I), который часто опосредует ядерный экспорт. белков. Специфическое взаимодействие между белками V2 и V1 было идентифицировано с помощью коиммунопреципитации (Co-IP) и бимолекулярной флуоресцентной комплементации (BiFC).Замены цистина 85 в белке V2 ингибируют взаимодействие V1-V2, блокируют действие белка V2 на субклеточную локализацию белка V1 и вызывают у растений замедленные и легкие симптомы. Наши результаты показывают, что белок V2 взаимодействует с белком V1, способствует ядерному экспорту белка V1 и играет важную роль в вирусной системной инфекции.

   Результаты

   Белок V2 влияет на ядерную локализацию белка V1

   Вирус желтого скручивания листьев томата Белок V1 известен как ядерно-цитоплазматический челночный белок, который облегчает перенос вирусной геномной ДНК в ядро ​​и из ядра.При экспрессии в клетках N. benthamiana путем агроинфильтрации в виде YFP-меченного белка, V1-YFP, сигнал был обнаружен как в ядре, так и в цитоплазме через 40 часов после агроинфильтрации (hpai) (рисунок 1A), что соответствует его роли. в ядерной транспортировке вирусной геномной ДНК. Среди 100 клеток с четкой ядерной областью сильный сигнал YFP был обнаружен во всех клетках (рис. 1А).

   Рисунок 1. Влияние белка V2 на ядерное распределение белка V1. (A) Локализация белка V1 в отсутствие или в присутствии белка V2 в клетках N. benthamiana . V1-YFP экспрессируется отдельно, коэкспрессируется с BMV 1a-FLAG или FLAG-V2, обнаруживается либо конфокальной микроскопией (левая панель), либо вестерн-блоттингом с использованием поликлонального антитела против GFP (правая панель). Стрелки указывают на ядерные области в клетках. DAPI окрашивает ДНК в ядре. PEPC служит контролем для равной загрузки общих лизатов. Звездочка указывает на неспецифические полосы, обнаруженные во всех образцах.Прутки: 50 мкм. (B) Локализация V2 в клетках N. benthamiana . Экспрессированный YFP или V2-YFP в эпидермальных клетках листьев N. benthamiana определяли либо конфокальной микроскопией (левая панель), либо вестерн-блоттингом с использованием поликлональных антител против GFP (правая панель). Белые стрелки указывают на ядерные области в клетках, как показано в левом столбце. Красные стрелки указывают на агрегаты V2. DAPI окрашивает ДНК в ядре. Прутки: 50 мкм. (C) Распределение белка V1 в отсутствие или в присутствии FLAG-V2 в трансгенном h3B-RFP N.benthamiana при анализе с использованием анализа ядерно-цитоплазматического фракционирования. Ядра очищали центрифугированием в градиенте плотности Перколла. Вестерн-блоттинг проводился с антителами, специфичными к указанным белкам. PEPC и h3B-RFP использовали в качестве маркера цитоплазматической и ядерной фракций соответственно. Интенсивность белкового сигнала измеряли с помощью ImageQuant TL (GE healthcare), при этом уровни цитоплазмы плюс уровни ядра составляли 100%.

   Поскольку сообщалось, что белок V2 способствует экспорту вирусной геномной ДНК из ядра (Rojas et al., 2001), мы проверили, действует ли белок V2, способствуя экспорту белка V1 из ядра. Сначала мы проверили субклеточную локализацию белка V2 как YFP-метки (V2-YFP) в клетках N. benthamiana с помощью агроинфильтрации. Сигнал флуоресценции наблюдали под лазерным конфокальным микроскопом при 40 гпай. Большие агрегаты V2-YFP легко наблюдались при использовании высоких концентраций агробактерий для инфильтрации (дополнительный рисунок S1). Однако меньшее количество агрегатов наблюдалось при OD ₆₀₀ = 0.5 для проникновения (дополнительный рисунок S1). Кроме того, V2-YFP в основном присутствовал в цитоплазме и перинуклеарных областях, но гораздо более слабый сигнал также присутствовал в ядре (рис. 1B). Чтобы лучше изучить распределение V2-YFP в ядерной области, V2-YFP экспрессировали путем инфильтрации агробактерий при OD ₆₀₀ = 0,5.

   Чтобы дополнительно прояснить функцию белка V2 в ядерном экспорте TYLCV, мы совместно экспрессировали меченый FLAG белок V2 (FLAG-V2) с V1-YFP.Интересно, что сильный ядерный сигнал YFP был обнаружен только в ~ 13% клеток ( n = 100). Примерно в 87% клеток в ядре был обнаружен только слабый сигнал флуоресценции белка V1 по сравнению с сигналом только одного белка V1 (рис. 1А). Чтобы исключить возможность того, что более слабый сигнал V1-YFP в ядре был обусловлен сниженной экспрессией и / или стабильностью в присутствии V2, мы проверили накопление V1-YFP с помощью вестерн-блоттинга. Наши результаты показали, что оба белка V2 и V1 хорошо накапливались при совместной экспрессии (рис. 1A).Поскольку белок V2 функционирует как супрессор сайленсинга гена, повышенное накопление V1-YFP было замечено, когда он коэкспрессировался с FLAG-V2, что указывает на то, что более низкий сигнал V1-YFP в ядре не был связан с его уменьшенным накоплением в ядре. наличие FLAG-V2. Чтобы еще больше исключить возможность того, что сверхэкспрессия любого белка может влиять на распределение белка V1, мы включили репликационный белок 1a вируса мозаики брома (BMV) (Diaz and Wang, 2014; Zhang et al., 2019).BMV 1a представляет собой ER-мембранно-ассоциированный белок и перераспределяет специфические белки-хозяева в перинуклеарные ER-мембраны-инвагинированные вирусные репликационные комплексы (Diaz and Wang, 2014; Diaz et al., 2015; Zhang et al., 2016). Однако при коэкспрессии с V1-YFP, маркированный FLAG BMV 1a (BMV 1a-FLAG) не оказывал никакого влияния на локализацию V1-YFP, поскольку сильный сигнал был обнаружен в ядре во всех клетках с детектируемым YFP. сигнал ( n = 100, рис. 1A), что указывает на то, что перераспределение белка V1 специфически опосредуется белком V2.

   Чтобы подтвердить наши визуальные наблюдения, мы выполнили анализ фракционирования для отделения ядра от цитоплазмы (Mei et al., 2018) и проверили локализацию V1-YFP в отсутствие и в присутствии белка V2. С этой целью мы экспрессировали FLAG-V2 и V1-YFP в трансгенных растениях с гистоном 2B (h3B) -RFP (Martin et al., 2009). Как показано на рисунке 1C, мы обнаружили только h3B-RFP в ядерной фракции, но не цитоплазматической фракции; цитоплазматический маркер фосфоенолпируваткарбоксилаза (PEPC) присутствовал только во фракции цитоплазмы.В таких условиях FLAG-V2 обнаруживался в первую очередь во фракции цитоплазмы, но лишь слабо в ядре. Хотя V1-YFP был обнаружен в обеих фракциях, когда экспрессировался отдельно, количество в ядерной фракции значительно снижалось в присутствии FLAG-V2, что соответствовало результатам, основанным на флуоресцентной микроскопии (рис. 1C). Чтобы обеспечить числовое значение, мы устанавливаем сумму интенсивности сигнала V1-YFP в цитоплазме и ядре равной 100%. В отсутствие FLAG-V2 мы обнаружили, что 43% V1-YFP было связано с ядерной фракцией, но уменьшилось до 11% в присутствии FLAG-V2.На основании этих результатов мы пришли к выводу, что белок V2 способен изменять локализацию белка V1.

   Белок V2 взаимодействует с белком V1

   Затем мы решили понять основной механизм, с помощью которого белок V2 влияет на субклеточную локализацию белка V1, сначала проверив, существует ли взаимодействие между белками V2 и V1. Мы использовали анализ коиммунопреципитации (Co-IP), потому что белок V1 самоактивируется в дрожжевой двугибридной (Y2H) системе. Меченый FLAG белок V2 (FLAG-V2) коэкспрессировался с YFP или V1-YFP в N.Бентамиана . Экстракты общего белка подвергали иммунопреципитации с использованием гранул, улавливающих FLAG, и полученные преципитаты анализировали с помощью антитела против GFP или антитела против FLAG. Хотя аналогичное количество FLAG-V2 было сброшено с помощью гранул-ловушек FLAG, только V1-YFP, а не YFP, было сброшено вместе с FLAG-V2 (рис. 2A).

   Рисунок 2. Идентификация взаимодействия между белками V2 и V1. (A) Co-IP анализ взаимодействия между FLAG-V2 и V1-YFP. N. benthamiana. листьев совместно инфильтрировали с помощью FLAG-V2 и V1-YFP (дорожка 1), FLAG-V2 и YFP (дорожка 2) или только V1-YFP (дорожка 3). Лизаты клеток инкубировали с шариками-ловушками для FLAG и затем тщательно промывали. Образцы до (вход) и после (IP) иммунопреципитации анализировали с использованием антител против GFP или -FLAG. (B) BiFC анализирует взаимодействие между белками V1 и V2 в клетках N. benthamiana . Взаимодействие V1-V2 приводит к восстановлению сигнала флуоресценции.DAPI окрашивает ДНК в ядре. Прутки: 50 мкм.

   Тот факт, что белок V1 был соосажден с белком V2, предполагает, что белок V2 может связываться с белком V1 с образованием белкового комплекса V1-V2. Чтобы подтвердить взаимодействие V1-V2 и определить место, где белки V1 и V2 могут образовывать комплекс, мы использовали анализ комплементации бимолекулярной флуоресценции (BiFC). Положительное взаимодействие между nYFP-V1 и cYFP-V2 наблюдалось как в цитоплазме, так и в перинуклеарной области, на что указывает присутствие восстановленной флуоресценции (рис. 2B).Мы также заметили слабый сигнал флуоресценции внутри ядра. Следует отметить, что V1-YFP также локализуется в цитоплазме и перинуклеарной области при совместной инфильтрации с FLAG-V2 (рис. 1A), что позволяет предположить, что белок V2 связывает белок V1 в перинукле и цитоплазме. Сигнал флуоресценции не генерировался при совместной экспрессии nYFP-V1 и cYFP, или nYFP и cYFP-V2, или nYFP и cYFP (рис. 2B), усиливая специфическое взаимодействие между белками V2 и V1 в растительных клетках.

   Белок V2 опосредует ядерный экспорт белка V1 через Exportin-α хозяина

   Тот факт, что белок V2 повлиял на ядерную локализацию белка V1, повысил вероятность того, что белок V2 может способствовать экспорту белка V1 из ядра в цитоплазму или блокировать вход белка V1 в ядро.Поскольку ядерный экспорт белков часто опосредуется экспортином-α, мы проверили субклеточную локализацию белка V2 при лечении лептомицином B (LMB), ингибитором экспортина-α (Mathew and Ghildyal, 2017). Как и ожидалось, уровень локализованного в ядре V2-YFP увеличивался после обработки LMB (рис. 3A), предполагая, что белок V2 зависит от экспортина-α, чтобы выйти из ядра. Чтобы подтвердить наше наблюдение, мы провели анализ ядерно-цитоплазматического фракционирования на трансгенном h3B-RFP N.benthamiana , экспрессирующие V2-YFP с обработкой LMB или без нее. Как показано на фиг. 3B, h3B-RFP и PEPC были специфически детектированы, как и ожидалось, в ядерной и цитоплазматической фракциях соответственно. Около 32% от общего количества V2-YFP накопилось в ядре, но увеличилось до 54% ​​при лечении LMB (рис. 3B), что хорошо согласуется с нашими результатами визуализации (рис. 3A).

   Рисунок 3. V2-опосредованный ядерный экспорт белка V1 зависит от экспортина-α. (A) Субклеточное распределение V2-YFP без или с обработкой LMB в клетках трансгенного h3B-RFP N.benthamiana растение. Ткани листа сначала подвергали агроинфильтрации V2-YFP в течение 40 часов, а затем 10 нМ LMB в течение 2 часов. Сигнал h3B-RFP представляет собой ядро. Прутки: 50 мкм. (B) Ядерно-цитоплазматический фракционный анализ распределения V2 с обработкой LMB или без нее в h3B-RFP трансгенных растениях N. benthamiana . Вестерн-блоттинг проводили с антителами, специфичными к указанным белкам. PEPC и h3B-RFP использовали в качестве маркера цитоплазматической и ядерной фракций соответственно.Интенсивность белкового сигнала измеряли с помощью ImageQuant TL (GE healthcare), при этом уровни цитоплазмы и ядра составляли 100%. (C) Субклеточное распределение V1-YFP, коэкспрессируемого с FLAG-V2, при обработке LMB и DMSO в трансгенных клетках h3B-RFP N. benthamiana . Ткани листа, экспрессирующие FLAG-V2 и V1-YFP, сначала инфильтрировали 10 нМ LMB в течение 2 часов с последующей инфильтрацией 0,5% DMSO для разложения LMB. Сигнал YFP наблюдали в определенные моменты времени, как указано.Стрелки указывают сигнал V1-YFP в ядре или вокруг него в разные моменты времени. Сигнал h3B-RFP представляет собой ядро. Прутки: 50 мкм. (D) Влияние обработки LMB на взаимодействие V1-V2, как показано с помощью BiFC, в трансгенных растениях h3B-RFP N. benthamiana . Ткани растений, коэкспрессирующие nYFP-V1 с cYFP-V2, обрабатывали LMB в течение 2 часов для инактивации экспортина-α, а затем инфильтровали 0,5% DMSO для разрушения LMB. Конфокальные микрофотографии были сделаны в указанные моменты времени. Стрелки указывают восстановленный сигнал YFP в ядре или вокруг него в разные моменты времени.Сигнал h3B-RFP представляет собой ядро. Прутки: 50 мкм.

   Мы также проверили, может ли лечение LMB повлиять на V2-опосредованную релокализацию V1-YFP. Коэкспрессируется с FLAG-V2, V1-YFP имел очень низкое накопление в ядре (верхняя панель, фиг. 3C), но сильный ядерный сигнал наблюдался после обработки LMB (вторая панель, -DMSO, фиг. 3C), что позволяет предположить, что V2-опосредованная ядерная релокализация белка V1 подобна экспорту белка V2, который зависит от экспортина-α. Тот факт, что оба белка V1 и V2 накапливались в ядре в присутствии LMB, убедительно свидетельствует о том, что белок V2 не блокирует ядерный импорт белка V1, а скорее способствует выходу из ядра белка V1.

   Чтобы подтвердить специфический эффект LMB на локализации белков V1 и V2, мы дополнительно инфильтрировали обработанные LMB клетки 0,5% диметилсульфоксидом (DMSO), который делает LMB нестабильным и, таким образом, LMB становится неактивным (Mei et al., 2018) . Как и ожидалось, сигнал V1-YFP был обнаружен в ядре в присутствии FLAG-V2 и LMB в начале обработки DMSO (вторая панель, -DMSO, фигура 3C). Однако сигнал V1-YFP в ядре постепенно снижался после более длительной обработки ДМСО, которая устраняла ингибирующий эффект LMB (рис. 3C).

   Чтобы проверить ядерно-цитоплазматическое перемещение комплекса V1-V2, мы выполнили анализ BiFC, применяя те же методы лечения, что и выше. В присутствии только LMB восстановленный сигнал YFP сильно детектировался в ядре (рис. 3D), что указывает на то, что комплекс V1-V2 также присутствовал в ядре, а также в цитоплазме и перинуклеарной области (рис. 2В). После обработки ДМСО в течение 2 часов локализованный в ядре сигнал YFP существенно снизился, что сопровождалось увеличением интенсивности сигнала в цитоплазматической области на ~ 13%, что свидетельствует об экспортном экспорте комплекса V1-V2 в ядро, опосредованном экспортином-α ( Рисунок 3D).Эти результаты показали, что ядерно-цитоплазматический перенос белка V1 зависит от белка V2 и экспортина-α.

   A V2 Мутант C85A отменяет взаимодействие V1-V2

   Чтобы проверить, что взаимодействие V1-V2 играет решающую роль в ядерном экспорте белка V1, и определить приблизительные сайты в белке V2, которые отвечают за взаимодействие, мы сконструировали шесть мутантов V2 из области (рис. 4A), которая играет важную роль в самовзаимодействии V2-V2 (Zhao et al., 2018) и взаимодействие между V2 и белками хозяина (Glick et al., 2008). Затем мы проверили их взаимодействие с белком V1 с помощью анализа Co-IP. Среди шести мутантов V2 пять из них (G70A, S71A, K73A, C84AC86A и T96A) взаимодействовали с белком V1, а также с белком wt (данные не показаны). Однако мутант V2 ^C85A , который имеет замену цистеина на аланин в остатке в положении 85, не был хорошо разрушен вместе с FLAG-V1, потому что была обнаружена только намного более слабая полоса по сравнению с полосой V2-YFP дикого типа ( Рисунок 4B).Замена аланина не повлияла на экспрессию и стабильность мутанта V2 ^C85A , поскольку V2-YFP и V2 ^C85A -YFP накапливались на аналогичных уровнях (вверху, панель ввода, фигура 4B).

   Рисунок 4. Идентификация критических сайтов в белке V2, ответственных за взаимодействие V1-V2. (A) Схематическое изображение белка V2. Показаны нуклеиновые и аминокислотные последовательности мутантов V2, V2 ^G70A , V2 ^S71A , V2 ^K73A , V2 ^C85A , V2 ^C84AC86A и V2 ^T96A . (B) Взаимодействие между V1 и wt V2 или V2 ^C85A исследуют с помощью анализа совместного IP. Анализ Co-IP выполняли, как показано на рисунке 2A. (C) Y2H, обнаруживающий возможные взаимодействия между SlSGS3 и V2 ^C85A или V2 ^C84AC86A . V2 ^C85A и V2 ^C84AC86A были слиты с доменом активации GAL4 (AD-V2 ^C85A и AD-V2 ^C84AC86A ), а SlSGS3 был слит с GAL4-связывающим доменом (BD-SlSGS3) соответственно.Клетки Ah209, котрансформированные указанными плазмидами, подвергали 10-кратным серийным разведениям и высевали на синтетическую среду SD / -His / -Leu / -Trp для скрининга на наличие положительных взаимодействий. Клетки дрожжей, ко-трансформированные с помощью AD-T + BD-53 или AD-T + BD-Lam, служат в качестве положительного контроля или отрицательного контроля соответственно. (D) Анализ Co-IP для демонстрации взаимодействия между V1 и V2 или V2 ^C84AC86A . Анализ Co-IP выполняли, как показано на рисунке 2A.

   Хорошо известно, что белок V2 участвует в PTGS, связываясь с SGS3 томата (SlSGS3), ортологом белка SGS3 Arabidopsis (Glick et al., 2008). Было подтверждено, что двойной мутант V2, V2 ^C84SC86S , не взаимодействует с SlSGS3 и теряет свою функцию супрессора молчания генов (Glick et al., 2008). Учитывая тот факт, что C85 находится рядом с C84 и C86, возможно, что V2 ^C85A может быть дисфункциональным не только во взаимодействии с белком V1, но также и с SlSGS3. С этой целью мы подтвердили, что V2 ^C85A , но не V2 ^C84AC86A , взаимодействовал с SlSGS3 в системе Y2H (рис. 4C), что указывает на то, что замена C85A специфически блокирует взаимодействие V1-V2, но не нарушает другие функции белок V2, такой как способность взаимодействовать с SlSGS3, что приводит к блокировке опосредованной сайленсингом защиты хозяина.Чтобы напрямую проверить, может ли C85A нарушать активность белка V2 в подавлении сайленсинга генов, мы временно экспрессировали wt V2 или V2 ^C85A в GFP-заглушенных растениях 16c N. benthamiana (Nawaz-ul-Rehman et al., 2010). . Чтобы вызвать молчание генов GFP, Agrobacterium , несущие вектор экспрессии GFP, временно инфильтрировали в трансгенную линию GFP 16c на стадии 4 листьев. Через пять дней после агроинфильтрации экспрессия GFP систематически подавлялась, и сигнал флуоресценции не обнаруживался (дополнительная фигура S2a).Эти GFP-замалчившие листья затем инфильтрировали Agrobacterium , несущими вектор, экспрессирующий V2 или V2 дикого типа ^C85A . Сильный сигнал GFP был восстановлен, когда белок p19 Tomato bushy stunt virus (TBSV) был экспрессирован в качестве положительного контроля (дополнительная фигура S2b). Как и ожидалось, экспрессия wt V2 привела к детектируемому сигналу GFP в инфильтрированной области, хотя и не столь сильному, как у инфильтрированной p19 области (дополнительный рисунок S2b; Zrachya et al., 2007). Экспрессия V2 ^C85A также восстанавливала сигнал GFP до уровня, аналогичного уровню wt V2. Количественная ПЦР с обратной транскрипцией (qRT-PCR) дополнительно подтвердила, что аналогичные уровни транскриптов GFP накапливались в растениях, экспрессирующих мутант V2 wt или V2 ^C85A (дополнительный рисунок S2c), что согласуется с примечанием о том, что мутант C85A не влияет на активность подавления подавления гена белка V2.

   Чтобы еще раз подтвердить, что C85, но не C84 и C86, имеет решающее значение для взаимодействия V1-V2, мы также проверили способность V2 ^C84AC86A (рис. 4A) взаимодействовать с белком V1.Анализ Co-IP показал, что мутант V2 ^C84AC86A взаимодействовал с белком V1 (рис. 4D). Взятые вместе, активности белка V2 во взаимодействии с белком V1 и SlSGS3 можно разделить, где мутация C85A блокирует взаимодействие белка V2 с белком V1, но не с SlSGS3.

   Мутант V2

   ^C85A не может перераспределить белок V1

   После подтверждения того, что V2 ^C85A хорошо накапливается и взаимодействует с SlSGS3, но не с белком V1, мы затем проверили локализацию V2 ^C85A , экспрессируя YFP-tagged V2 ^C85A (V2 ^C85A -YFP) в N.benthamiana клеток. В 56% клеток, экспрессирующих V2 ^C85A -YFP (фиг. 5B), в цитоплазме и перинуклеарной области (фиг. 5A) наблюдался сигнал флуоресценции, аналогичный сигналу V2-YFP дикого типа (wt). Однако в 44% клеток сигнал флуоресценции был более распространен, чем у V2-YFP, а также наблюдался в удлиненной области за пределами ядра, окрашенного DAPI (рис. 5A). Характер локализации еще предстоит определить. Следует отметить, что мутация C85A не повлияла на экспрессию или стабильность V2-YFP, поскольку V2 ^C85A -YFP накапливается на том же уровне, что и V2-YFP (Фигуры 4B, 5C).Эти результаты показали, что C85 оказывает некоторое влияние на перинуклеарную локализацию белка V2.

   Рисунок 5. Характеристика мутанта V2 ^C85A . (A) Субклеточная локализация V2 и V2 ^C85A . DAPI окрашивает ДНК в ядре. Белые стрелки в левом столбце указывают на ядерные области в клетках. Красные стрелки указывают на агрегаты V2. Прутки: 50 мкм. (B) Количественная оценка перинуклеарного распределения V2 и V2 ^C85A .Количество клеток с перинуклеарным распределением в разных образцах, как в a. Эксперименты повторяли трижды, и в каждом повторении наблюдали 30 клеток. Значения представляют собой процент клеток с перинуклеарным распределением сигнала YFP ± SD (стандартное отклонение). Данные были проанализированы с использованием теста Стьюдента t , и звездочки обозначают значительные различия между V2-YFP- и V2 ^C85A -YFP-инфильтрованными листьями (* P <0,05). (C) Вестерн-блоттинг, показывающий накопленные V2 и V2 ^C85A с использованием поликлонального антитела против GFP.Актин служит регулятором для равной нагрузки. (D) Локализация V1-YFP, экспрессируемого отдельно или совместно с V2 ^C85A в листьях N. benthamiana . Стрелки в левом столбце указывают на ядерные области в клетках. Прутки: 20 мкм. (E) Сравнение локализованного в ядре V1-YFP в отсутствие или в присутствии V2 ^C85A . Было проанализировано не менее 150 клеток из трех независимых повторов. Значения представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение для растений, инфильтрованных V1-YFP в отсутствие или в присутствии V2 ^C85A .Данные были проанализированы с использованием теста Стьюдента t . (F) Накопленные V1-YFP и FLAG-V2 ^C85A , как показано с помощью вестерн-блоттинга.

   Чтобы проверить влияние замены C85A в белке V2 на локализацию V1, FLAG-V2 ^C85A коэкспрессировали с V1-YFP в клетках N. benthamiana . Сильный сигнал V1-YFP был обнаружен в ядре в присутствии FLAG-V2 ^C85A , аналогично тому, когда V1-YFP экспрессировался отдельно (фиг. 5D).Среди 50 клеток, которые были исследованы на предмет локализации белка V1, не наблюдалось очевидных различий в характере распределения V1-YFP в отсутствие или в присутствии V2 ^C85A (рис. 5E), что позволяет предположить, что V2 ^C85A не был способен к влияют на ядерную локализацию белка V1. Поскольку V1-YFP накапливается на более высоком уровне в присутствии V2 ^C85A по сравнению с тем, что в отсутствие V2 ^C85A (Рисунок 5F), мы предполагаем, что нарушенное взаимодействие V1-V2 отвечает за неудачное перераспределение V1. -YFP.Однако мы не можем полностью исключить возможность того, что замещение аланина может повлиять на другие не охарактеризованные функции.

   Замена C85 в белке V2 задерживает системную вирусную инфекцию

   Чтобы оценить роль взаимодействия V1-V2 в вирусной инфекции, мы включили замену в C85 ORF V2 в остов инфекционного клона TYLCV. Поскольку ORF V2 перекрывается с ORF V1 в геноме TYLCV, мутации в V2 могут влиять на аминокислотную последовательность V1.Чтобы гарантировать, что конкретное изменение в C85 не влияет на белок V1 в геноме TYLCV, мутация C85S вместо мутации C85A была введена в клон TYLCV для генерации TYLCV-C85S. Необходимо обратить внимание на то, что мутант V2 ^C85S не взаимодействовал с белком V1 (дополнительный рисунок S3a), но взаимодействовал с SlSGS3 (дополнительный рисунок S3b) и, в свою очередь, сохранял свою активность в качестве супрессора молчания генов (дополнительные рисунки) S2б, в). Наиболее важно то, что мутант V2 ^C85S не влиял на субклеточную локализацию V1-YFP (дополнительный рисунок S3c), аналогично свойствам V2 ^C85A .Затем TYLCV-C85S и TYLCV использовали для инокуляции растений томата ( Solanum lycopersicum ) и растений N. benthamiana .

   Пятнадцать растений томатов инокулировали либо TYLCV дикого типа, либо TYLCV-C85S. Такие симптомы, как хлороз на листьях, очевидно, наблюдались через 13 дней после инфицирования (dpi) у растений томатов, инокулированных TYLCV дикого типа, но не у растений, инокулированных TYLCV-C85S. Подавляющее большинство инокулированных TYLCV-C85S растений томатов оставалось бессимптомным даже при 33 dpi, и только у 1-2 растений из 15 в конечном итоге развились легкие симптомы, такие как пожелтение листьев (Фигуры 6A, B).Кроме того, средняя высота растений томатов, инокулированных TYLCV-C85S, составляла 32 ± 3,4 см, что было выше, чем у растений, инокулированных TYLCV, и составляло 22 ± 2,0 см (фигура 6C). ПЦР в реальном времени показала, что уровни вирусной геномной ДНК были намного ниже в системных листьях растений, инокулированных TYLCV-C85S, чем в растениях, инокулированных TYLCV дикого типа при 13, 23 и 33 dpi (фиг. 6D). Они соответствовали наличию типичных симптомов у растений, инфицированных TYLCV дикого типа, но отсутствовали или были очень легкими симптомами у растений, инфицированных TYLCV-C85S, при 33 dpi (Фигуры 6A, B).

   Фиг. 6. Влияние мутации C85S на вирусную инфекцию и накопление вируса в инокулированных TYLCV растениях томатов. (A) Симптомы у растений, которые были агроинокулированы TYLCV дикого типа или TYLCV-C85S при 33 dpi. Макет представляет собой имитацию инокулированных растений. На увеличенных изображениях показаны желтеющие и скрученные листья. (B) Динамика инфекции TYLCV или TYLCV-C85S дикого типа. Значения, представляющие процент системно инфицированных растений при различных точках на дюйм, даны как среднее ± стандартное отклонение от трех экспериментов.В каждом эксперименте инокулировали 15 растений и проводили четыре независимых повтора. (C) Высота надземных растений томатов, инокулированных Mock-, TYLCV- или TYLCV-C85S, при измерении при 33 dpi. (D) Накопленная вирусная ДНК в растениях по данным количественной ПЦР. Накопленные уровни вирусной ДНК тестировали в растениях с TYLCV-, TYLCV-C85S- или имитацией инокулирования при 3, 13, 23 и 33 dpi. Тотальную ДНК экстрагировали из недавно появившихся системных листьев. Значения представляют собой среднее значение относительно растений, обработанных имитацией ( n = 3 биологических повтора), и были нормализованы с использованием SlActin в качестве внутреннего стандарта.

   Аналогичные результаты были также получены на инокулированных TYLCV-C85S растениях N. benthamiana . Все растения, инокулированные TYLCV дикого типа, проявляли симптомы уже при 13 dpi, такие как пожелтение и скручивание листьев, как показано на Фигуре 7A. Однако только 3-4 из пятнадцати растений, инокулированных TYLCV-C85S, проявили легкие симптомы (фигура 7B). Мы действительно заметили, что растения, инфицированные TYLCV-C85S, были короче (18 ± 1,1 см) по сравнению со здоровыми растениями — 30 ± 2,0 см (рис. 7C). Накопленная геномная ДНК TYLCV (фигура 7D) в системных листьях растений, инокулированных TYLCV-C85S, была намного ниже, чем у растений, инокулированных TYLCV дикого типа, при 13, 23 и 33 dpi, что соответствует наличию типичных симптомов в системных листьях растений. wt растений, инокулированных TYLCV, но отсутствующие или очень легкие симптомы в системных листьях растений, инокулированных TYLCV-C85S (фиг. 7A).

   Фигура 7. Влияние мутации C85S на вирусную инфекцию и накопление вируса в инокулированном TYLCV N. benthamiana . (A) Симптомы у растений, которые были агроинокулированы TYLCV дикого типа или TYLCV-C85S при 33 dpi. Макет представляет собой имитацию инокулированных растений. (B) Динамика инфекции TYLCV или TYLCV-C85S дикого типа. Значения представляют собой процент системно инфицированных растений, как показано на рисунке 6B. (C) Высота надземных растений ложно инокулированных, TYLCV- или TYLCV-C85S N.benthamiana при разрешении 33 dpi. (D) Накопленную вирусную ДНК в растениях измеряли с помощью кПЦР. qPCR был выполнен, как показано на рисунке 6D. NbActin в качестве внутреннего эталона.

   В совокупности эти результаты показали, что мутация C85 белка V2 вызывает значительно низкие уровни накопления вируса в системных листьях и резкое снижение эффективности заражения с отсроченными и легкими симптомами.

   Обсуждение

   Поскольку репликация генома геминивирусов происходит в ядре инфицированных клеток-хозяев (Hanley-Bowdoin et al., 2013), крайне важно транспортировать ДНК вирусного потомства из ядра обратно в цитоплазму для внутриклеточного, межклеточного и дальнего перемещения. В двудольных геминивирусах хорошо известно, что белок BV1 облегчает транспортировку вирусного генома в ядро ​​хозяина и из него (Brough et al., 1988; Etessami et al., 1988; Sudarshana et al., 1998; Jeffrey et al. др., 1996; Ye et al., 2015). Сообщалось, что в однораздельных геминивирусах белок V1 опосредует импорт и экспорт вирусной ДНК (Kunik et al., 1998, 1999; Рохас и др., 2001). Однако белок V1 может быть не единственным вирусным белком, который участвует в ядерно-цитоплазматическом перемещении TYLCV. Предыдущие отчеты, основанные на экспериментах с тройной микроинъекцией, показали, что ядерный экспорт вирусной ДНК увеличивался на 20-30% в присутствии белков V2 и V1 по сравнению с таковым только с белком V1 (Rojas et al., 2001). Однако механизм, с помощью которого белок V2 способствует экспорту вирусной ДНК, неясен. Наши результаты предполагают, что белок V2 может облегчить экспорт вирусной ДНК, взаимодействуя с белком V1 и способствуя ядерному экспорту белка V1.

   В этом исследовании мы обнаружили, что белок V2 локализован в основном в перинуклеарной области и цитоплазме (рис. 1B). В ядре также присутствовал очень слабый сигнал (рис. 1B, C), но после обработки ингибитором экспортина-α LMB количество локализованного в ядре белка V2 значительно увеличилось (рис. 3A), что позволяет предположить, что белок V2 перемещается между ядро и цитоплазма, но быстро выводится из ядра через экспортин-α. Однако неясно, как белок V2 импортируется в ядро.

   Наша работа показала, что белок V1 в основном локализован в ядре, когда экспрессируется отдельно, но локализованный в ядре V1 исчезает при совместной экспрессии с белком V2 (рис. 1A), предполагая, что V2 либо способствовал ядерному экспорту V1, либо ингибировал ядерный экспорт. вход белка V1. Хотя мы не можем полностью исключить возможность того, что V2 может препятствовать проникновению белка V1 в ядро, наши данные предполагают, что белок V2 играет критическую роль в ядерном экспорте белка V1, поскольку локализованный в ядре V1 уменьшался, когда V2 присутствовал (рис. 1A). ).Кроме того, белок V1 все еще накапливался в ядре при экспрессии вместе с V2 в присутствии LMB (рис. 3C), что позволяет предположить, что белок V2 усиливает ядерный экспорт V1, но не ядерный импорт. Мы также показали, что конкретное взаимодействие V1-V2 тесно коррелирует с трафиком V1. Взаимодействие V1-V2 в основном происходило в перинуклеарной области и цитоплазме (Рисунок 2B), но было четко обнаружено в ядре после обработки LMB (Рисунок 3D), что позволяет предположить, что они могут находиться в комплексе или комплексах на протяжении репликации вируса и движения в инфицированном клетки.Кроме того, это также предполагает, что LMB только специфически блокирует транспорт V2 из ядра, но не влияет на взаимодействие V1-V2. Однако наши данные не смогли определить, опосредует ли белок V2 ядерный импорт белка V1. Кроме того, наши результаты не исключают возможность того, что другие вирусные белки, такие как белок C4, также могут быть вовлечены в этот процесс.

   Было обнаружено, что

   Cysteine85 белка V2 имеет решающее значение для взаимодействия V1-V2, поскольку замены Cys85 на аланин (рисунок 4B) или серин (дополнительный рисунок S3a) привели к существенному ингибированию взаимодействия с V1 и, таким образом, его способности облегчать транспорт V1. из ядра (рисунки 5D, E для C85A и дополнительный рисунок S3c для C85S).Поскольку белок V1 известен своей способностью связываться с ядерно-цитоплазматическим переносом вирусной ДНК и облегчать его перенос (Kunik et al., 1998, 1999; Rojas et al., 2001), и потому что V2 способствует ядерному экспорту вирусной ДНК вместе с белком V1 (Rojas et al., al., 2001), мы предполагаем, что V2-промотированный ядерный экспорт вирусной ДНК, скорее всего, происходит через взаимодействие V1-V2. Наша гипотеза согласуется с нашими результатами о том, что мутант TYLCV-C85S, который имеет мутацию C85S, включенную в инфекционный клон TYLCV, привел к отсроченному появлению симптомов и снижению накопления вируса (рисунки 6, 7).Эти результаты показали, что C85 белка V2 играет важную роль в вирусной системной инфекции.

   В однораздельных геминивирусах белок V2 является многофункциональным белком, который участвует в подавлении PTGS и TGS хозяина, патогенности и системной инфекции (Wartig et al., 1997; Zrachya et al., 2007; Bar-Ziv et al., 2012; Wang и др., 2014, 2018). Замена цистеина 85 может влиять на функции, отличные от его взаимодействия с белком V1, особенно потому, что Cys84 и Cys86 имеют решающее значение для взаимодействия с SlSGS3 и подавления сайленсинга генов (Glick et al., 2008). Мы обнаружили, что даже несмотря на то, что мутанты C85A (рисунок 4B) или C85S (дополнительный рисунок S3a) не могли взаимодействовать с белком V1 и, таким образом, транспортировка V1 из ядра (рисунки 5D, E; дополнительный рисунок S3c), оба сохраняли свою активность как супрессор молчания гена (Рисунок 4C; дополнительные рисунки S3b, S2). Эти результаты также согласуются с представлением о том, что мутация C85S задерживает системную вирусную инфекцию, влияя на V1-опосредованный транспорт вирусной геномной ДНК из ядра в цитоплазму, а не на нарушение защиты хозяина, опосредованной сайленсингом генов.Однако мы не можем полностью исключить возможность того, что мутация C85S влияет на другие стадии вирусной инфекции, опосредованной V2, помимо передачи вирусной ДНК.

   Наши данные также показали, что двойной мутант V2 C84AC86A взаимодействовал с V1 (рис. 4D), но не с SlSGS3 (рис. 4C), что указывает на то, что C84 и C86 не связаны со способностью V2 взаимодействовать с белком V1. Таким образом, наши результаты показали, что мотивы, ответственные за ядерный экспорт V1 и супрессорную активность молчания генов, могут быть независимыми друг от друга.

   Было обнаружено, что белок TYLCV V2 связан с крупными цитоплазматическими агрегатами (Moshe et al., 2015; Zhao et al., 2018). Мы продемонстрировали, что количество агрегатов V2 связано с концентрацией Agrobacterium , используемой для инфильтрации (дополнительный рисунок S1). Хорошо известно, что многие вирусы вызывают образование агрегатов / телец включения в инфицированных клетках, которые могут участвовать в репликации вируса и, в конечном итоге, связаны с вирусной инфекцией (Wileman, 2006; Gorovits et al., 2013). Однако агрегаты, индуцированные сверхэкспрессированным белком V2, локализуются в основном в цитоплазме, но не в ядре, где происходит репликация TYLCV, что позволяет предположить, что эти агрегаты могут не быть связаны с репликацией вируса. Взаимосвязь между агрегатами V2 и вирусной инфекцией требует дальнейшего изучения.

   Наши результаты показали, что белок V2 связывается с белком V1 и способствует ядерному экспорту белка V1. Во время инфекции TYLCV V1 опосредует как ядерный импорт, так и экспорт вирусной ДНК.Равновесие между ядерным нацеливанием и выходом изменяется после завершения репликации, и взаимодействие V1-V2 может улучшить ядерный экспорт комплекса V1-ДНК. Таким образом, вирусная ДНК будет предпочтительно транспортироваться из ядра для последующих инфекционных событий. В присутствии мутанта V2 ^C85S ядерный экспорт V1 замедляется или устраняется, и, следовательно, вирусная ДНК и последующее вирусное межклеточное и системное перемещение задерживаются. Однако мы не можем полностью исключить, что комплекс V1-V2 также необходим для внутриклеточного, межклеточного и / или перемещения на большие расстояния помимо ядерного экспорта белка V1 и V1-опосредованных ДНК потомков вирусов.

   Основываясь на наших результатах здесь, мы предлагаем рабочую модель роли белка V2 в V1-опосредованном ядерном экспорте геномной ДНК TYLCV (рис. 8). Когда вирусная геномная ДНК потомства продуцируется в ядре, они связываются белком V1 (Palanichelvam et al., 1998). Комплекс V2-V1-вирусная ДНК впоследствии образуется посредством специфического взаимодействия между V1 и V2, и с помощью экспортина-α V2 способствует выходу комплекса V1-вирусной ДНК из ядра в перинуклеус и цитоплазму с усилением эффективность.В конце концов, TYLCV распространяется на соседние клетки и верхние листья, что приводит к системной инфекции. Эффективность инфицирования и накопление TYLCV в системных листьях резко подавляются из-за дефектного взаимодействия V2-V1.

   Рис. 8. Рабочая модель, предложенная для V2-опосредованного ядерно-цитоплазматического переноса белка V1. Вирусные геномные ДНК связываются с помощью V1 и импортируются в ядро ​​с помощью KAP α1 посредством специфического взаимодействия между V1 и V2, что приводит к образованию комплекса V2-V1-оцДНК.С помощью экспортина-α, V2 способствует выходу комплекса V1-ssDNA из ядра в перинуклеус и цитоплазму.

   Таким образом, наши результаты показывают, что один из механизмов участия белка V2 в транспортировке вирусной ДНК состоит в том, чтобы способствовать V1-опосредованному выходу вируса из ядра в перинуклеарную область и цитоплазму посредством специфического взаимодействия с белком V1 в форме V2. -V1-вирусный ДНК-комплекс и через экспорт-α хозяина. Однако вопрос о том, способствует ли V2 способности V1 связывать вирусную ДНК и работает ли взаимодействие V1-V2 после ядерной транспортировки, требует дальнейших исследований.

   Экспериментальные процедуры

   Конструкция плазмиды

   Кодирующие последовательности генов TYLCV V2 и V1 были амплифицированы из кДНК TYLCV-инфицированного растения томата из провинции Цзянсу, Китай (номер доступа в GenBank GU111505) (Ji et al., 2008), с использованием соответствующих праймеров (дополнительная таблица S1) . Сайт-специфичные мутанты V2 ^G70A , V2 ^S71A , V2 ^K73A , V2 ^C85A , V2 ^C84AC86A , V2 ^C85S и V2 ^T96A были синтезированы секвенирование (рис. 4А).Дополнительные сведения см. В электронной вспомогательной информации.

   Субклеточная локализация белков

   Экспрессионные векторы p1300-YFP, V2-YFP, V1-YFP, V2 ^C84AC86A -YFP, V2 ^C85A -YFP и V2 ^C85S -YFP были индивидуально введены в штамм A. tumefaciens GV3101 посредством электропорации. Листья 4-недельного растения N. benthamiana инфильтрировали A. tumefaciens , несущим указанные конструкции. При 40 hpai листья вырезали и флуоресценцию YFP исследовали в клетках эпидермиса с помощью конфокальной микроскопии (Zeiss LSM 710).Микроскоп был оснащен дихроичным зеркалом 458–515 нм для двойного возбуждения и светоделителем на 488 нм для разделения флуоресценции YFP.

   Анализ комплементации бимолекулярной флуоресценции (BiFC)

   Эксперименты по комплементации бимолекулярной флуоресценции были выполнены, как описано ранее (Shen et al., 2012) с небольшими модификациями. Конструкции nYFP-V1 и cYFP-V2 вводили индивидуально в GV3101 путем электропорации. После роста и активации в течение ночи культуры агробактерий объединяли и инфильтрировали в листья N.Бентамиана . После агроинфильтрации N. benthamiana выращивали в камере для выращивания с циклом 16 часов света / 8 часов темноты. Флуоресценцию YFP наблюдали и фотографировали с помощью конфокальной микроскопии (Zeiss LSM 710) при 48 hpai. YFP наблюдали в свете ртутной лампы с использованием возбуждающего фильтра 488 нм. Фотографические изображения были подготовлены с использованием ZEN 2011SP1.

   Анализ совместной иммунопреципитации

   Анализ Co-IP проводили, как описано ранее (Zhao et al., 2018).Проникшие листьев N. benthamiana собирали при 40 гпай. Белки экстрагировали в IP-буфере (40 мМ Трис-HCl при pH 7,5, 100 мМ NaCl, 5 мМ MgCl ₂ , 2 мМ ЭДТА, 2 × ингибитор протеиназы без ЭДТА, 1 мМ ФМСФ, 4 мМ ДТТ, 1% глицерин. , 0,5% Тритон-Х100). После центрифугирования супернатант смешивали с шариками-ловушками FLAG (Sigma, США). После 1 ч инкубации при 4 ° C шарики промывали IP-буфером и ресуспендировали в загрузочном буфере 2 × SDS. Образцы загружали на 12% (об. / Об.) Гель SDS / PAGE, и целевые белки детектировали с использованием поликлонального антитела против GFP (GenScript, США) или моноклонального антитела против FLAG (Sigma, США).

   Дрожжевой двухгибридный анализ

   Дрожжевую двугибридную систему использовали для изучения взаимодействий между V2, V2 ^C85A , V2 ^C84AC86A и SlSGS3. V2, V2 ^C85A и V2 ^C84AC86A были клонированы в вектор активационного домена (AD), а SlSGS3 был клонирован в вектор, несущий ДНК-связывающий домен (BD). Обе конструкции трансформировали в дрожжевой штамм Ah209. Плазмидная пара BD-53 и AD-recT служила в качестве положительного контроля, а BD-Lam и AD-recT использовалась в качестве отрицательного контроля.Трансформанты выращивали при 30 ° C в течение 72 часов на синтетической среде, не содержащей гистина, лейцина и триптофана (SD / -His / -Leu / -Trp), для тестирования белок-белковых взаимодействий.

   Ядерно-цитоплазматический анализ фракционирования

   Анализы ядерно-цитоплазматического фракционирования выполняли, как описано ранее (Wang et al., 2011), с небольшими изменениями. Инфильтрованные листья собирали и смешивали с 2 мл / г буфера для лизиса (20 мМ трис-HCl, pH 7,5, 20 мМ KCl, 2 мМ EDTA, 2,5 мМ MgCl ₂ , 25% глицерин, 250 мМ сахароза, 5 мМ DTT. , 10 мМ ингибитор протеазы).Центрифугированный осадок ресуспендировали в 500 мкл NRB2 и накладывали поверх 500 мкл NRB3. Конечный осадок ядра ресуспендировали в буфере для лизиса. В качестве контроля качества для анализов фракционирования, белок РЕРС и h3B-RFP использовали в качестве цитоплазматического и ядерного маркера, соответственно. Дополнительные сведения см. В электронной вспомогательной информации.

   Анализы лечения лептомицином В

   Анализы лечения лептомицином B (LMB) проводили, как описано ранее (Mei et al., 2018), с небольшими изменениями.LMB (Fisher Scientific, США) растворяли в этаноле для приготовления 10 мМ исходных растворов. Для обработки in vivo листьев N. benthamiana исходные растворы разбавляли водой для приготовления рабочего раствора 10 нМ LMB. После агроинфильтрации листьев N. benthamiana , экспрессирующих интересующий белок при 40 гпай, инфильтрировали 10 нМ LMB. Через два часа после обработки LMB инфильтрованные листья были вырезаны и помещены на предметное стекло для конфокальной визуализации.При необходимости ДМСО дополнительно инфильтровали в листья, обработанные LMB, и собирали ткани в указанные моменты времени.

   TYLCV Constructs for

   Agrobacterium — Mediated Inoculation

   Для создания ДНК-клона TYLCV, содержащего V2 ^C85S , полноразмерный мутант TYLCV, синтезировали TYLCV-C85S (Invitrogen, Китай). Инфекционный клон TYLCV-C85S и wt TYLCV были сконструированы, как описано ранее (Zhao et al., 2018). Дополнительные сведения см. В электронной вспомогательной информации.

   Культуры Agrobacterium , несущие конструкции TYLCV, инъецировали в стебель томата и N. benthamiana с помощью шприца. Инокулированные растения выращивали в шкафу без насекомых с дополнительным освещением, соответствующим режиму 16 часов света и 8 часов темноты.

   Количественная ПЦР

   Тотальную ДНК экстрагировали из ложных ( Agrobacterium — несущих пустой вектор) — томатов, инфильтрованных TYLCV или TYLCV-C85S, или листьев N. benthamiana в разные моменты времени.Реакционные смеси RCR состояли из 6 мкл супермикса SYBR Green (BIO-RAD, США), 0,10 мкл каждого праймера (10 пмоль) и 1,5 мкл образца ДНК (10 нг / мкл) в общем объеме 12 мкл.

   реакции ПЦР были выполнены в системе обнаружения ПЦР в реальном времени Applied Biosystems 7500 (Life Technologies). SlActin или NbActin использовали в качестве внутреннего контроля для томатов или N. benthamiana соответственно. Анализ данных проводился с использованием программного обеспечения Applied Biosystems 7500 версии 2.0.6.

   Заявление о доступности данных

   Кодирующие последовательности TYLCV V2 и V1 доступны в базе данных NCBI с номером доступа GU111505.

   Авторские взносы

   YZ, YJ, XW и WZ разработали проект. WZ, SW и EB проводили эксперименты. Все авторы проанализировали данные и просмотрели рукопись. WZ, YJ и XW написали рукопись.

   Финансирование

   Это исследование финансировалось грантами Национального фонда естественных наук Китая (№31572074 и 31770168), Национальная программа ключевых исследований и разработок Китая (№ 2018YFD0201208), Фонд инноваций в области сельскохозяйственных наук и технологий Цзянсу [№ CX (18) 2005], Китайская система сельскохозяйственных исследований (№ CARS-24-C-01) и Фонд Цзянсуской академии сельскохозяйственных наук (№ 6111614).

   Конфликт интересов

   Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

   Благодарности

   Мы благодарим докторов наук. Сью Толин и Джанет Вебстер из Технологического института Вирджинии, США, за критическое прочтение рукописи. Мы также благодарим доктора Эрнана Гарсиа-Руиса из Университета Небраски в Линкольне за предоставление pZAP-GFP.

   Дополнительные материалы

   Дополнительные материалы к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2020.01243/full#supplementary-material

   Список литературы

   Бар-Зив, А., Леви, Ю., Хак, Х., Метт, А., Белаусов, Э., Цитовски, В. и др. (2012). Белок (TYLCV) V2 взаимодействует с папаин-подобной цистеиновой протеазой хозяина CYP1. Завод Сигнал. Behav. 7, 983–989. DOI: 10.4161 / psb.20935

   PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

   Боултон, М. И., Паллаги, К. К., Чатани, М., МакФарлейн, С., и Дэвис, Дж. У. (1993). Репликация мутантов вируса полосатости кукурузы в протопластах кукурузы: доказательства наличия белка движения. Вирусология 192, 85–93.DOI: 10.1006 / viro.1993.1010

   PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

   Боултон, М. И., Стейнкелльнер, Дж., Донсон, Дж., Маркхэм, П. Г., Кинг, Д. И., и Дэвис, Дж. У. (1989). Мутационный анализ вирионо-смысловых генов вируса полосатости кукурузы. J. Gen. Virol. 70, 2309–2323. DOI: 10.1099 / 0022-1317-70-9-2309

   PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

   Бро, К. Л., Хейс, Р. Дж., Морган, А. Дж., Куттс, Р. Х. А., и Бак, К.W. (1988). Влияние мутагенеза in vitro на способность клонированной ДНК вируса золотой мозаики томатов инфицировать растения Nicotiana benthamiana . J. Gen. Virol. 69, 503–514. DOI: 10.1099 / 0022-1317-69-3-503

   CrossRef Полный текст | Google Scholar

   Диас А., Чжан Дж., Олвертер А., Ван X. и Алквист П. (2015). Белки ESCRT хозяина необходимы для сборки и функционирования компартмента репликации бромовирусной РНК. PLoS Pathog. 11: e1004742.DOI: 10.1371 / journal.ppat.1004742

   PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

   Диас-Пендон, Дж. А., Канисарес, М. К., Морионес, Э., Бехарано, Э. Р., Чоснек, Х., и Навас-Кастильо, Дж. (2010). Вирусы курчавости желтых листьев томатов: трофей между вирусным комплексом, растением и переносчиком белокрылки. Мол. Завод Патол. 11, 441–450. DOI: 10.1111 / j.1364-3703.2010.00618.x

   PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

   Этессами, П., Каллис, Р., Эллвуд, С., и Стэнли, Дж. (1988). Определение основных генов ДНК латентного вируса маниоки 2. Nucleic Acids Res. 16, 4811–4829. DOI: 10.1093 / nar / 16.11.4811

   PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

   Фоке, К. М., Бриддон, Р. У., Браун, Дж. К., Морионес, Э., Стэнли, Дж., Зербини, М. и др. (2008). Демаркация и номенклатура штаммов геминивирусов. Arch. Virol. 153, 783–821. DOI: 10.1007 / s00705-008-0037-6

   PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

   Гафни, Ю.и Эпель Б. Л. (2002). Роль белков-хозяев и вирусных белков во внутриклеточном и межклеточном перемещении геминивирусов. Мол. Завод Патол. 60, 231–241. DOI: 10.1006 / pmpp.2002.0402

   CrossRef Полный текст | Google Scholar

   Глик Э., Леви Ю. и Гафни Ю. (2009). Вирусная этиология болезни желтого скручиваемости листьев томатов — обзор. Plant Protoc. Sci. 45, 81–97. DOI: 10,17221 / 26/2009-ппс

   CrossRef Полный текст | Google Scholar

   Глик, Э., Зрачя, А., Леви, Ю., Метт, А., Гидони, Д., Белаусов, Э. и др. (2008). Взаимодействие с хозяином SGS3 необходимо для подавления сайленсинга РНК белком V2 вируса курчавости желтых листьев томата. PNAS 105, 157–161. DOI: 10.1073 / pnas.070

05

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Горовиц Р., Чоснек Х. (2017). Участие белков теплового шока в возникновении инфекции, вызванной вирусом желтого скручивания листьев томатов. Фронт. Plant Sci. 8: 355. DOI: 10.3389 / fpls.2017.00355

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Горовиц Р., Лю Ю., Чоснек Х. (2016). «Участие HSP70 и HSP90 в инфицировании вирусом желтого листа томата курчавости растений томата и насекомых-переносчиков», в Heat Shock Proteins and Plants , ред. A. Asea, P. Kaur и S. Calderwood (Cham: Springer), 189–207. DOI: 10.1007 / 978-3-319-46340-7_10

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Горовиц, Р., Моше, А., Колот, М., Соболь, И., и Чоснек, Х. (2013). Прогрессирующая агрегация белка оболочки вируса желтого скручивания листьев томата в системно инфицированных растениях томатов, чувствительных и устойчивых к вирусу. Virus Res. 171, 33–43. DOI: 10.1016 / j.virusres.2012.09.017

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хэнли-Боудойн, Л., Бехарано, Э. Р., Робертсон, Д., и Мансур, С. (2013). Геминивирусы: мастера перенаправления и перепрограммирования процессов растений. Нат. Rev. Microbiol. 11, 777–788. DOI: 10.1038 / nrmicro3117

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Джеффри, Дж. Л., Поома, В., и Петти, И. Т. Д. (1996). Генетические требования к локальному и системному перемещению вируса золотой мозаики томатов в инфицированных растениях. Вирусология 223, 208–218. DOI: 10.1006 / viro.1996.0469

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Джеске, Х. (2009). Геминивирусы. Curr.Вершина. Microbiol. Иммунол. 331, 185–226.

Google Scholar

Ji, Y., Xiong, R., Cheng, Z., Zhou, T., Zhao, T., Yu, W., et al. (2008). Молекулярная диагностика болезни желтого скручиваемости листьев томатов в провинции Цзянсу. Acta Hortic. 35, 1815–1818.

Google Scholar

Куник Т., Мизрахи Л., Цитовский В. и Гафни Ю. (1999). Характеристика кариоферина томата, который взаимодействует с капсидным белком вируса желтого скручивания листьев томата (TYLCV). J. Exp. Бот. 50, 731–732. DOI: 10.1093 / jexbot / 50.334.731

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Куник Т., Паланичелвам К., Чоснек Х., Цитовски В. и Гафни Ю. (1998). Ядерный импорт капсидного белка вируса желтого скручивания листьев томата (TYLCV) в клетки растений. Plant J. 13, 393–399. DOI: 10.1046 / j.1365-313x.1998.00037.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лазаровиц, С.Г., и Бичи, Р.Н. (1999). Белки вирусного движения как зонды для внутриклеточного и межклеточного переноса в растениях. Растительная клетка 11, 535–548. DOI: 10.1105 / tpc.11.4.535

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лю Х., Бултон М. И., Опарка К. Дж. И Дэвис Дж. У. (2001). Взаимодействие движения и белков оболочки вируса полосы кукурузы: последствия для транспорта вирусной ДНК. J. Gen. Virol. 82, 35–44. DOI: 10.1099 / 0022-1317-82-1-35

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мартин, К., Копперуд, К., Чакрабарти, Р., Банерджи, Р., Брукс, Р., и Гудин, М. М. (2009). Временная экспрессия в линиях флуоресцентных маркеров Nicotiana benthamiana обеспечивает улучшенное определение локализации, движения и взаимодействий белка в planta. Plant J. 59, 150–162. DOI: 10.1111 / j.1365-313x.2009.03850.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мэй, Ю., Ван, Ю., Ху, Т., Янг, X., Лозано-Дюран, Р., Сантер, Г. и др. (2018).Нуклеоцитоплазматический перенос белка C4 геминивируса, опосредованный фосфорилированием и миристоилированием, имеет решающее значение для вирусной патогенности. Мол. Завод 11, 1466–1481. DOI: 10.1016 / j.molp.2018.10.004

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Морионес Э. и Навас-Кастильо Дж. (2000). Вирус желтого скручивания листьев помидоров — новый вирусный комплекс, вызывающий эпидемии во всем мире. Virus Res. 71, 123–134. DOI: 10.1016 / s0168-1702 (00) 00193-3

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Моше, А., Белаусов, Э., Ниль, А., Хайнлайн, М., Чоснек, Х., и Горовиц, Р. (2015). Белок V2 вируса желтого листа томата скручивания образует агрегаты в зависимости от целостности цитоскелета и связывает вирусную геномную ДНК. Sci. Rep. 5, 1–13.

Google Scholar

Накла, М. К., и Максвелл, Д. П. (1997). Эпидемиология и лечение болезни желтого скручиваемости листьев томатов. Plant Virus Dis. Контроль 43, 565–583.

Google Scholar

Навот, Н., Пичерский, Е., Зейдан, М., Замир, Д., и Чоснек, Х. (1991). Вирус желтого листа томата курчавости: геминивирус, передающийся белокрылкой, с одним геномным компонентом. Вирусология 185, 151–161. DOI: 10.1016 / 0042-6822 (91) -2

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Наваз-уль-Рехман, М. С., Нахид, Н., Мансур, С., Бриддон, Р. У., и Фоке, К. М. (2010). Посттранскрипционная активность супрессора подавления гена двух непатогенных альфа-сателлитов, связанных с бегомовирусом. Вирусология 405, 300–308.DOI: 10.1016 / j.virol.2010.06.024

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Падидам М., Бичи Р. Н. и Фоке К. М. (1995). Геминивирус курчавости листьев томата из Индии имеет двудольный геном, и белок оболочки не является важным для инфекционности. J. Gen. Virol. 76, 25–35. DOI: 10.1099 / 0022-1317-76-1-25

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Паланичелвам К., Куник Т., Цитовски В. и Гафни Ю. (1998).Капсидный белок вируса желтого скручивания листьев томата кооперативно связывается с одноцепочечной ДНК. J. Gen. Virol. 79, 2829–2833. DOI: 10.1099 / 0022-1317-79-11-2829

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рохас М. Р., Хаген К., Лукас У. Дж. И Гилбертсон Р. Л. (2005). Использование щелей в панцире растений: эволюция и появление геминивирусов. Annu. Rev. Phytopathol. 43, 361–394. DOI: 10.1146 / annurev.phyto.43.040204.135939

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рохас, М.R., Jiang, H., Salati, R., Xoconostle-Cazares, B., Sudarshana, M. R., Lucas, W. J., et al. (2001). Функциональный анализ белков, участвующих в перемещении монодостаточного бегомовируса, вируса курчавости листьев томата. Вирусология 291, 110–125. DOI: 10.1006 / viro.2001.1194

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Саху П. П., Шарма Н., Пураник С., Мутамиларасан М. и Прасад М. (2014). Участие регуляторных путей хозяина во время геминивирусной инфекции: новая платформа для создания устойчивой устойчивости. Funct. Интегр. Геномика 14, 47–58. DOI: 10.1007 / s10142-013-0346-z

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Scholthof, K. B. G., Scott, A., Henryk, C., Palukaitis, P., Jacquot, E., Hohn, T., et al. (2011). Топ-10 вирусов растений в молекулярной патологии растений. Мол. Завод Патол. 12, 938–944.

Google Scholar

Шен, К., Лю, З., Сун, Ф., Се, К., Хэнли-Боудойн, Л., и Чжоу, X. (2012). Белок SlSnRK1 томата взаимодействует и фосфорилирует βC1, белок патогенеза, кодируемый β-сателлитом геминивируса. Plant Physiol. 157, 1394–1406. DOI: 10.1104 / стр.111.184648

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сударшана, М. Р., Ван, Х. Л., Лукас, В. Дж., И Гилбертсон, Р. Л. (1998). С использованием зеленого флуоресцентного белка выявлена ​​динамика межклеточного и дальнего перемещения геминивируса бобовой мозаики Phaseolus vulgaris на большие расстояния. Мол. Растительный микроб. Взаимодействовать. 11, 277–291. DOI: 10.1094 / mpmi.1998.11.4.277

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван, Б., Ли, Ф., Хуанг, К., Янг, X., Цянь, Ю., Се, Ю., и др. (2014). V2 вируса курчавости желтых листьев томата может подавлять опосредованное метилированием молчание транскрипционных генов у растений. J. Gen. Virol. 95, 225–230. DOI: 10.1099 / vir.0.055798-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван, Б., Ян, X., Ван, Y., Xie, Y., и Zhou, X. (2018). Вирус желтого скручивания листьев томата V2 взаимодействует с гистондеацетилазой 6 хозяина для подавления опосредованного метилированием сайленсинга транскрипционных генов у растений. J. Virol. 92: e0036-18.

Google Scholar

Wang, W., Ye, R., Xin, Y., Fang, X., Li, C., Shi, H., et al. (2011). Белок importin ß отрицательно регулирует активность микроРНК в Arabidopsis . Растительная клетка 23, 3565–3576. DOI: 10.1105 / tpc.111.0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Wartig, L., Kheyr, P. A., Noris, E., Kouchkovsky, F. D., Jouanneau, F., Gronenborn, B., et al. (1997). Генетический анализ однораздельного геминивируса курчавости желтых листьев томатов: роль ORF V1, V2 и C2 в вирусном патогенезе. Вирусология 228, 132–140. DOI: 10.1006 / viro.1996.8406

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Яаков Н., Леви Ю., Белаусов Е., Габа В., Лапидот М., Гафни Ю. (2011). Влияние одной аминокислотной замены в NLS-домене капсидного белка (CP) вируса желтого листа томата скручивания листьев томата (TYLCV-IL) на его активность и жизненный цикл вируса. Virus Res. 158, 8–11. DOI: 10.1016 / j.virusres.2011.02.016

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Е., Дж., Ян, Дж., Сун, Ю., Чжао, П., Гао, С., Юнг, К., и др. (2015). Геминивирус активирует ASYMMETRIC LEAVES 2 для ускорения цитоплазматического обмена мРНК, опосредованного DCP2, и ослабляет молчание РНК в Arabidopsis . PLoS Pathog. 11: e1005196. DOI: 10.1371 / journal.ppat.1005196

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zeng, R., Liu, X., Li, H., Wu, S., Huang, W., Zhai, Z., et al. (2020). Передача сигналов опасного пептида усиливает интернализацию детерминанты симптомов геминивируса в растительных клетках во время инфекции. J. Exp. Бот. 71, 2817–2827. DOI: 10.1093 / jxb / eraa053

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhang, J., Zhang, Z., Chukkapalli, V., Nchoutmboube, J. A., Li, J., Randall, G., et al. (2016). Вирусы с положительной цепью РНК стимулируют синтез фосфатидилхолина хозяином в сайтах репликации вируса. PNAS 113, E1064 – E1073.

Google Scholar

Zhang, Z., He, G., Filipowicz, N., Randall, G., Belov, G., Kopek, B., et al.(2019). Липиды хозяина в репликации генома вируса с положительной цепью РНК. Фронт. Microbiol. 10: 286. DOI: 10.3389 / fmicb.2019.00286

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhao, W., Ji, Y., Wu, S., Ma, X., Li, S., Sun, F., et al. (2018). Одна аминокислота в V2, кодируемая TYLCV, отвечает за его самовзаимодействие, агрегаты и патогенность. Sci. Отчет 8: 3561.

Google Scholar

Зрачя, А., Глик, Э., Леви, Ю., Арази, Т., Цитовски, В., и Гафни, Ю. (2007). Супрессор молчания РНК, кодируемый вирусом курчавости желтых листьев томатов — Израиль. Вирусология 358, 159–165. DOI: 10.1016 / j.virol.2006.08.016

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

It’s Some Tomato, Drug Shuttle (Abstract Science: 23-27 января)

Использование генетики томатов для создания более вкусных фруктов, почему инфицированные сальмонеллой мыши едят больше, использование полимеров для доставки лекарств через желудочную кислоту.

(Fierce Biotech, 24.01.17, Амира Аль Идрус)

Желудочная кислота действительно может влиять на эффективность лекарства, поэтому, чтобы обойти это препятствие, исследователи разработали крошечные подводные моторы, которые взаимодействуют с желудочной кислотой, чтобы помочь лекарству пройти через желудок и высвободить предварительно загруженное лекарство. Команда из Университета Сан-Диего-Сан-Диего недавно провела испытания магниевых сфер на мышах. Сферы покрыты очень тонким слоем золота и pH-чувствительного полимера, в который заключено лекарство.Как только жидкость в желудке достигает нейтрального значения pH, полимерное покрытие растворяется, высвобождая лекарство.

(Наука, 26.01.17, Митч Лесли)

Большинство из нас ненавидят мысль о еде во время приступа пищевого отравления. Мыши могут иметь совсем другой эффект. Микроб, вызывающий отравление сальмонеллой, на самом деле побуждает мышей есть больше, как показало недавнее исследование, опубликованное в Cell . Исследование, проведенное Джанель Айерс из Института биологических исследований Солка в Сан-Диего, предполагает, что тот же механизм, который побуждает мышей есть больше при заражении бактериями сальмонеллы, может использовать тот же прием для увеличения количества еды у онкологических больных и пожилых людей. , которые часто теряют желание поесть.

(Ученый, 26.01.17, Боб Грант)

Помидоры из супермаркета никогда не сравнятся со свежими помидорами. Не так быстро. Ученые раскрыли часть генетического кода томатов и определили путь, который может значительно улучшить вкус помидоров. Результаты, опубликованные на этой неделе в журнале Science , могут помочь производителям в коммерческих масштабах вдохнуть жизнь в плоды.

— Составлено старшим научным писателем Региной МакЭнери

.